斜帶石斑魚(yú)催乳素受體（PRLR）基因組DNA及其5’旁側(cè)序列克隆和PRLR的表達(dá)研究.pdf

1、本文通過(guò)GenomeWalkerPCR和基因組PCR，成功地獲得了斜帶石斑魚(yú)PRLR基因全長(zhǎng)和5’旁側(cè)區(qū)673bp序列。斜帶石斑魚(yú)PRLR基因全長(zhǎng)10199bp，包含9個(gè)外顯子，8個(gè)內(nèi)含子。轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)位于外顯子2上，轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)位于外顯子9上。在已獲得的5’旁側(cè)區(qū)序列上，沒(méi)有TATAbox序列，但存在轉(zhuǎn)錄因子C/EBPβ和Sp1的結(jié)合位點(diǎn)，這與哺乳動(dòng)物催乳素受體基因啟動(dòng)子Ⅲ(PⅢ)相似。 Northernblot分析表明：在斜

2、帶石斑魚(yú)腸、鰓絲和性腺中都檢測(cè)到一條2.37kb的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，其在腸和鰓表達(dá)量較高，在卵巢表達(dá)量比較微弱。此外，在鰓絲中還檢測(cè)到了PRLR另外兩種轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，分別為4.62kb和1.19kb。應(yīng)用兩步法RT-PCR結(jié)合Southernblot分析，我們進(jìn)一步研究了PRLR在斜帶石斑魚(yú)不同組織和早期發(fā)育時(shí)期的表達(dá)情況。 結(jié)果顯示：在檢測(cè)的組織中，PRLR都有表達(dá)。在垂體、皮膚、鰓絲中表達(dá)量最高，鰓弓、中腸、后腸、胃、性腺、脂肪表達(dá)量也