高黏度殼聚糖止血材料的制備及其應(yīng)用性研究.pdf

1、殼聚糖作為資源豐富且可再生的生物資源高分子材料，在生態(tài)材料及生物材料的研究中占據(jù)了相當(dāng)?shù)谋壤?。其諸多優(yōu)良的物理化學(xué)性質(zhì)和生物可降解性，生物相容性等優(yōu)點，對于拓寬殼聚糖在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用范圍，開發(fā)出一系列生物相容性好的殼聚糖生物醫(yī)用材料具有重要意義。然而，殼聚糖在作為可吸收止血材料的應(yīng)用時，制備工藝尚不完善，且殼聚糖原料脫乙酰度和黏度對其止血性能影響的研究較少。基于這些原因，本文研究了高黏度、高脫乙酰度殼聚糖的制備方法和殼聚糖復(fù)合止血膜的

2、制備工藝，并對制備產(chǎn)物進行了安全性和實用性檢測。主要結(jié)論如下:
　　 1、按以下方法進行脫乙酰反應(yīng)可在降低能耗和物耗的前提下獲得高黏度和較高脫乙酰度殼聚糖。將洗滌干燥后的甲殼素粉碎至60～80目加入40％質(zhì)量分?jǐn)?shù)的NaOH溶液，使NaOH溶液與甲殼素質(zhì)量比為12∶1，40℃下攪拌10min后立即放入800W、2450MHz微波爐內(nèi)加熱預(yù)處理3min取出，過濾后將產(chǎn)物加入50％濃度NaOH溶液，使NaOH溶液與甲殼素質(zhì)量比為12∶

3、1，混勻并控溫加熱至90℃，保持恒溫并攪拌40min，產(chǎn)物用純水沖洗至pH值7.2～7.5，在105℃下烘干3h。最后獲得的殼聚糖產(chǎn)物脫乙酰度為85.32％，表觀黏度為1271mPa·s，黏均分子量為1.16×106。
　　 2、按以下方法制備殼聚糖復(fù)合膜，不僅止血性能優(yōu)秀，還具有良好的柔韌性和吸水性。①殼聚糖凝膠制備:取4g殼聚糖，加入2％乙酸溶液200mL，室溫(20～25℃)攪拌至完全溶解，配制成2％的殼聚糖溶液，靜置脫泡

4、，之后過濾，得澄清殼聚糖溶液，在70℃下烘干1h，然后將上述殼聚糖溶液注入培養(yǎng)皿中，并放入沉析液過夜（沉析液由無水乙醇、5％濃度丙三醇、8％濃度NaOH按體積比100∶10∶1混合配制），至殼聚糖完全沉析形成殼聚糖凝膠，用去離子水沖洗至中性。②殼聚糖表面羧化:在密閉玻璃器皿中加氯乙酸、異丙醇(質(zhì)量比1∶10)，堿化后加熱至70℃，將步驟①獲得的殼聚糖凝膠放入并反應(yīng)30min后取出，用足量乙醇反復(fù)洗滌5～6次。③交聯(lián)反應(yīng)及凝血因子的引入:

5、將經(jīng)過步驟②制得的殼聚糖凝膠浸入1％濃度的氯化鈣中進行交聯(lián)反應(yīng)30min，后用去離子水洗滌。④增塑反應(yīng):將步驟③得到的殼聚糖凝膠放入30％質(zhì)量濃度的丙三醇溶液中進行增塑反應(yīng)6h，取出瀝干，在70℃下鼓風(fēng)干燥3h，即得到高黏度殼聚糖復(fù)合止血膜。
　　 3、溶血實驗和急性全身毒性實驗初步證明，本文方法制備的高黏度殼聚糖復(fù)合膜具有生物安全性。其中:溶血實驗發(fā)現(xiàn)，本材料溶血率為0.73％，不會引發(fā)溶血，具有血液相容性;急性全身毒性實驗結(jié)

6、果說明，本材料浸提液的大劑量注射不會引起小鼠體重異常及代謝紊亂，即不會引起急性全身毒性反應(yīng)。
　　 4、體外降解實驗和凝血實驗說明，在相同條件下制備止血材料后，本文方法制備的高黏度殼聚糖較其他脫乙酰度和黏度的殼聚糖，生物降解速度更快，凝血效果更好。其中:體外降解實驗中，脫乙酰度85％的殼聚糖材料在20000U/mL的PBS-Lysozyme溶液中在5h內(nèi)完全降解，說明85％左右的脫乙酰度有助于加速生物降解;體外凝血實驗中，本實驗