2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、21年前,人們在藍藻類囊體膜上發(fā)現(xiàn)了一種新型的光合膜蛋白復(fù)合體,稱之為NADPH脫氫酶復(fù)合體(NDH-1)。研究發(fā)現(xiàn),該復(fù)合體介導(dǎo)了圍繞光系統(tǒng)1的循環(huán)電子傳遞、參與細胞呼吸和CO2吸收。迄今為止,人們已發(fā)現(xiàn)NDH-1復(fù)合體的至少18種組成亞基(NdhA-S)。
   為進一步研究藍藻NDH-1復(fù)合體的亞基組成及各自的功能,我們利用高光對集胞藻6803的突變體庫進行篩選,分離得到兩個在高光下生長緩慢,而在正常光條件下與野生型細胞生

2、長無顯著差異的突變體。PCR檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),兩個突變體中slr1280基因(ndhK基因)被突變。為進一步探究藍藻NdhK亞基的生理功能,我們利用同源重組方法,構(gòu)建pUC-△ndhK載體,并通過自然轉(zhuǎn)化獲得相關(guān)突變體,經(jīng)多次繼代培養(yǎng)后,利用PCR、Western等技術(shù)對所獲突變體進行核酸和蛋白水平的鑒定。結(jié)果表明,KamR編碼序列成功捅入ndhK基因保守區(qū)域,并且成功抑制了ndhK基因的表達。由此,我們成功獲得了ndhK基因的缺失突變體。

3、
   然后,我們利用葉綠素α熒光、P700+氧化還原以及P700+暗還原等參數(shù)對NdhK亞基的生理功能進行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)NdhK亞基的缺失削弱了由NDH-1介導(dǎo)的圍繞光系統(tǒng)Ⅰ的循環(huán)電子傳遞,并且這種削弱與NDH-1的表達與組裝無關(guān)。為了驗證上述結(jié)果,我們又利用高光作為培養(yǎng)條件,對突變體進行培養(yǎng),結(jié)果表明在高光條件下,ndhK基因缺失突變體生長受到明顯抑制,且相關(guān)生理參數(shù)也明顯下調(diào)。這一結(jié)果再次肯定NdhK亞基的缺失降低了NDH

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