動脈粥樣硬化ApoE---小鼠CXCR7的表達及阿托伐他汀的干預影響.pdf

1、目的：
　　研究動脈粥樣硬化模型的ApoE-/-小鼠動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）病變中趨化因子受體7（C-X-C chemokine receptor7，CXCR7）的表達水平以及阿托伐他汀的干預影響，探究兩者在動脈粥樣硬化斑塊形成過程中的相互關系。
　　方法：
　　1、ApoE-/-雄性小鼠36只，隨機分為3組：基礎對照組（n=12，普通飼料，3-5g/只/天）、高脂模型組（n=12，高脂飼料

2、，3-5g/只/天）及他汀干預組（n=12，高脂飼料，3-5g/只/天+阿托伐他汀10mg/Kg/d）；其中他汀干預組在高脂喂養(yǎng)4周后給予阿托伐他汀干預治療，共給予高脂飼料飼養(yǎng)12周。
　　2、血脂檢測試劑盒分別檢測初始及干預結束后小鼠血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三脂（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白-膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，L

3、DL-C）以及高密度脂蛋白-膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）的水平；
　　3、動脈油紅O染色及動脈HE染色觀察動脈粥樣硬化病變及病理形態(tài)學變化；
　　4、Western Blot和免疫組織化學法檢測血管組織中CXCR7、p38-MAPK蛋白的表達情況，Western Blot檢測血管組織中Akt、eNOS蛋白的表達水平。
　　結果：
　　1、成功建立動

4、脈粥樣硬化模型ApoE-/-小鼠：
　?、僭诟咧嬍澄桂B(yǎng)12周后，主動脈弓及主動脈根部石蠟切片 HE染色示小鼠主動脈內(nèi) AS斑塊明顯，可見有粥樣核心及纖維帽的顯著斑塊，斑塊內(nèi)大量泡沫細胞形成和堆積；
　?、谠诟咧嬍澄桂B(yǎng)12周后，主動脈整體油紅O染色示動脈內(nèi)膜面可見多處紅染脂質(zhì)斑塊形成，多位于血管分叉處。
　　2、動脈粥樣硬化模型小鼠動脈組織中CXCR7的表達及阿托伐他汀的干預影響：
　　2.1血脂檢測結果

5、>　　（1）基礎血脂示：各組小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C的初始水平無明顯差異性（P＞0.05）；
　?。?）干預后血脂示：高脂飲食誘導后高脂模型組小鼠血清TC、TG、LDL的水平明顯高于基礎對照組（TC：P＜0.01，TG：P＜0.05，LDL-C：P＜0.01），HDL水平明顯低于基礎對照組（P＜0.01）；經(jīng)他汀干預治療后小鼠血清TC、TG、LDL水平較高脂模型組下降（TC：P＜0.01，TG：P＜0.05，LD

6、L-C：P＜0.05），HDL水平較高脂模型組升高（P＜0.01），而與基礎對照組相比血清血脂水平無明顯差異性（P＞0.05）。
　　2.2病理學形態(tài)觀察
　?。?）主動脈弓HE染色示高脂模型組小鼠主動脈內(nèi)可見有粥樣核心及纖維帽的顯著的斑塊，他汀干預組也可見泡沫細胞及典型的粥樣斑塊，基礎對照組內(nèi)膜完整，未見泡沫細胞聚集及AS斑塊的形成；
　?。?）主動脈根部HE染色示在高脂模型組、他汀干預組以及基礎對照組3組的瓣膜處都

7、可見內(nèi)膜增生及明顯斑塊形成，但測量每組小鼠瓣膜處斑塊相對面積（斑塊面積/瓣膜面積）示高脂模型組相對面積最大，他汀干預組斑塊相對面積較高脂模型組減少，但較基礎對照組仍有增加。
　?。?）主動脈整體油紅O染色示高脂模型組紅染脂質(zhì)斑塊明顯，他汀干預組也可見斑塊，但較高脂模型組斑塊負荷輕，基礎對照組內(nèi)膜光滑，僅在主動脈弓處可見極少量紅染斑塊，各組之間斑塊相對面積（斑塊面積/血管整體面積）比示高脂模型組及他汀干預組小鼠AS斑塊相對面積高于基

8、礎對照組（P＜0.01），他汀干預組較高脂模型組下降（P＜0.01）。
　　2.3 CXCR7蛋白的表達
　?。?）免疫組織化學法檢測主動脈CXCR7的表達示高脂模型組動脈細胞著色淺，CXCR7表達量少；基礎對照組顆粒呈深棕黃色，示CXCR7大量表達；他汀干預組與基礎對照組比較，細胞著色較淺，但與高脂模型組比較，表達量仍有增加；
　?。?）Western Blot檢測主動脈CXCR7的表達示高脂模型組及他汀干預組CXC

9、R7的表達較基礎組表達降低（P＜0.01）；而他汀干預組經(jīng)他汀藥物治療后CXCR7的表達較高脂模型組增加（P＜0.01）；
　　2.4 Western Blot檢測動脈組織中Akt、eNOS蛋白的表達
　　高脂模型組及他汀干預組Akt、eNOS的表達較基礎對照組表達降低（P＜0.01），同時給予他汀藥物治療后他汀干預組動脈組織Akt、eNOS的表達較高脂模型組增加（P＜0.01）；
　　2.5 p38-MAPK蛋白的表

10、達
　?。?）免疫組織化學法檢測主動脈p38-MAPK的表達示高脂模型組顆粒呈深棕黃色，示p38-MAPK大量表達；他汀干預組與高脂模型組比較，細胞著色較淺，但與基礎對照組比較，表達量仍有增加；基礎對照組細胞著色淺，p38-MAPK表達量最少；
　?。?）Western Blot檢測主動脈p38-MAPK的表達示高脂模型組及他汀干預組p38-MAPK的表達較基礎對照組表達升高（P＜0.01），同時給予他汀治療后他汀干預組動脈