乳核散結(jié)顆粒制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、研究方藥系由夏枯草、柴胡、香附、青皮、赤芍、當(dāng)歸、川芎、郁金八味中藥組成，為臨床常用婦科經(jīng)驗(yàn)方，作為醫(yī)院協(xié)定制劑之藥，以湯劑形式已應(yīng)用于臨床多年，療效確切。但其為中藥湯劑，需臨用新制，藥材利用率不高，煎煮過程相對(duì)繁瑣，方中揮發(fā)性成分易損失，且口服劑量大，味道較苦，久置易發(fā)霉，攜帶不便，不宜長(zhǎng)期保存等。本研究依據(jù)該方藥的成分理化特性及功能主治，考慮服用對(duì)象主要是乳腺增生患者，為提高及穩(wěn)定藥物制劑之需，方便用藥和攜帶，特選擇固體工藝制劑為首

2、，又因本方藥服用劑量大，即日服相當(dāng)中藥生藥72 g，預(yù)試驗(yàn)其藥材出膏率約10％，其制成膠囊或片劑，服用量亦較多，則選定比較適宜制成顆粒劑。顆粒劑除具有溫水中溶解迅速，起效快，服用量適當(dāng)，生物利用度高等特點(diǎn)，同時(shí)還具有攜帶方便，易貯藏，便于工業(yè)化生產(chǎn)的優(yōu)勢(shì)，綜合考慮擬將該湯劑研制成中藥顆粒劑—乳核散結(jié)顆粒。
　　乳核散結(jié)方藥的提取工藝研究，依據(jù)方藥組成系由夏枯草為君藥、柴胡為臣藥及其它藥材所含的主要有效成分、功能主治及臨床應(yīng)用為基礎(chǔ)

3、，并結(jié)合工業(yè)大生產(chǎn)可行性、設(shè)備條件等多方因素，綜合設(shè)計(jì)其制劑工藝路線。方中君藥夏枯草，主要含有三萜類、甾體類、黃酮類、香豆素類等化合物，現(xiàn)代藥理學(xué)表明夏枯草具有降壓、降糖、抗菌、抗病毒、抗炎、免疫抑制、抗腫瘤等作用。臣藥柴胡主要含有皂苷、黃酮、揮發(fā)油類等成分，現(xiàn)代藥理學(xué)表明柴胡具有解熱、抗病毒、抗菌、抗炎、促酶分泌、保肝、提高免疫力、抗腫瘤等作用。其它藥赤芍主要含有單萜類、三萜類、兒茶素類、酚酸類等化合物，現(xiàn)代藥理學(xué)表明赤芍具有抗凝、抗

4、血栓、抑制血小板聚集、抗內(nèi)毒素等作用。川芎主要含有揮發(fā)油、生物堿、、酚類、有機(jī)酸類、苯酞內(nèi)酯類等生物活性成分，現(xiàn)代藥理學(xué)表明川芎具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、心腦血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、子宮平滑肌等作用。郁金主要含有揮發(fā)油類、姜黃素類、微量元素等化合物，現(xiàn)代藥理學(xué)表明郁金具有抗癌、抗菌、抗氧化、利膽保肝等作用。綜合以上，對(duì)夏枯草、柴胡、赤芍、川芎、郁金五味藥材以水提取為主要有效部位，采取水煎煮法提取。以提取干膏得率和君藥夏枯草中迷迭香酸的含量綜合評(píng)分，為

5、量化評(píng)價(jià)指標(biāo)；采用正交實(shí)驗(yàn)方法，優(yōu)選出最佳制備工藝條件：10倍加水量、前兩次煎1.5h、第三次煎1 h；而香附、青皮、當(dāng)歸均含揮發(fā)油，為發(fā)揮藥效的主要有效成分，具有明顯的藥理作用，所以采取水蒸氣蒸餾法提取混合揮發(fā)油，得出最佳工藝：香附、青皮、當(dāng)歸藥材粉碎度為最粗粉，加10倍水量，蒸餾3 h。因此藥材提取工藝采取雙提法，即水煎煮提取法和水蒸氣蒸餾法。
　　考慮揮發(fā)油易揮發(fā)，穩(wěn)定性差，需用β-CD包合，因此通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)β-CD包合揮

6、發(fā)油工藝進(jìn)行考察，得出包合最佳工藝：（β-CD：揮發(fā)油）為10:1，包合溫度為40℃，包合時(shí)間為1h。同時(shí)為了減少口服劑量，適度精制，采取對(duì)五味藥材水提液和三味藥材提取揮發(fā)油后的水溶液合并，濃縮至密度1.09，加入75%乙醇，醇沉48 h，除雜，過濾，得到上清液，回收乙醇，濃縮至1.25（25℃）清膏。由于清膏干燥成干膏耗能，且干膏粉的吸濕性非常強(qiáng)，故選擇濕法制粒。將所得清膏分別與糊精、可溶性淀粉和糖粉按一定比例混勻制成顆粒，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表

7、明，通過輔料的加入改善了顆粒的流動(dòng)性及吸濕性，考慮到生產(chǎn)實(shí)際和成本，選用的輔料為糊精和糖粉。從清膏與輔料混合后的顆粒的成型率、吸濕性、流動(dòng)性和溶化性考察，清膏與糖粉、糊精（2.5:1）的混合輔料按（1:3.5）混合為最優(yōu)，再加入包合物混合，制粒。
　　為控制乳核散結(jié)顆粒制劑的質(zhì)量、確保其臨床療效，研究采用 TLC對(duì)乳核散結(jié)顆粒中柴胡、當(dāng)歸和川芎、郁金四味藥進(jìn)行定性鑒別，其 TLC分離度較好，專屬性強(qiáng)；以RP-HPLC建立了成品顆粒

8、中迷迭香酸的含量檢測(cè)方法，色譜柱為十八烷基硅烷鍵合反相硅膠柱（ODS，4.6 mm×250 mm，5μm)；填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸（21:79）；流速為1 mL·min-1；柱溫為30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為330 nm；進(jìn)樣20μL。結(jié)果：迷迭香酸在0.202~4.040μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為99.41%，RSD為1.60%，并考察了三批顆粒樣品三個(gè)月的初步穩(wěn)定性，各考察項(xiàng)目均符合藥典的規(guī)定，表明