噪聲引起的耳蝸損傷及表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的防護(hù)作用.pdf

1、噪聲可使聽功能發(fā)生不可逆性喪失，導(dǎo)致噪聲性聾(NIHL)。噪聲暴露后，耳蝸內(nèi)產(chǎn)生大量自由基，其發(fā)生氧化應(yīng)激導(dǎo)致毛細(xì)胞死亡。如一氧化氮自由基(NO)被氧化為過氧亞硝基陰離子，后者進(jìn)一步硝基化，生成3-硝基酪氨酸(3-NT)。
　　綠茶中的茶多酚有很強(qiáng)的抗氧化活性，表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）是其中抗氧化作用最強(qiáng)的成分，具有抗炎、抗衰老、抗突變、抗癌、保護(hù)神經(jīng)及清除體內(nèi)自由基等作用。在本課題中，對豚鼠行預(yù)防性腹腔注射EGCG，

2、從聽功能和形態(tài)學(xué)兩方面研究其對噪聲性聾的防護(hù)作用。
　　一、噪聲引起的聽力損失及EGCG對聽功能的保護(hù)
　　目的:建立噪聲性聾動物模型，探究EGCG對豚鼠噪聲性聽力損失的防護(hù)作用。方法:45只豚鼠隨機(jī)分為3組:EGCG+噪聲組，生理鹽水+噪聲組，正常對照組。EGCG+噪聲組和生理鹽水+噪聲組豚鼠在接受噪聲暴露(120 dB SPL,4h)前一日及每次暴露前1h分別腹腔注射EGCG和生理鹽水(25mg/1000g)，正常對照組

3、不予噪聲暴露。噪聲暴露后，檢測三組豚鼠聽性腦干反應(yīng)(ABR)來評估豚鼠聽力下降程度。結(jié)果:正常對照組豚鼠ABR閾值為22±2.74 dB SPL，EGCG+噪聲組豚鼠ABR閾值為52.00±9.03 dB SPL，生理鹽水+噪聲組豚鼠ABR閾值為71.00±4.18 dB SPL，兩組間有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異。噪聲暴露后的第1、3、7和14天進(jìn)行ABR檢測，EGCG+噪聲組和生理鹽水+噪聲組豚鼠ABR閾值均有一定程度的恢復(fù)，但前者ABR閾值

4、均較后者更低。以短純音(Toneburst)為刺激聲，兩組豚鼠ABR閾值在2k、4k、8k、16k各頻率均具有統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論:預(yù)防性腹腔注射EGCG可減輕噪聲引起的聽力損失。
　　二、噪聲引起的耳蝸形態(tài)學(xué)變化及EGCG的防護(hù)作用
　　目的:觀察噪聲引起的耳蝸3-NT增加及其導(dǎo)致的外毛細(xì)胞損傷，探究預(yù)防性腹腔注射EGCG的防護(hù)作用。方法:通過DAPI染色細(xì)胞核、鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)染色細(xì)胞骨架并行外毛細(xì)胞計數(shù)，3

5、-硝基酪氨酸(3-NT)染色、外毛細(xì)胞運動蛋白(Prestin)染色對比各組豚鼠耳蝸內(nèi)3-NT差異及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化。最后進(jìn)行半定量，比較組間差異。結(jié)果:60倍激光共聚焦顯微鏡下成像并計數(shù)外毛細(xì)胞，正常對照組為60.1±0.71個，生理鹽水+噪聲組為43.5±2.39個，EGCG+噪聲組為53.9±1.63個。組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。IHC染色顯示，與生理鹽水+噪聲組相比，EGCG+噪聲組豚鼠外毛細(xì)胞形態(tài)較好，Prestin染色清晰，3-