封合微流控芯片中蛋白質(zhì)陣列的制作.pdf

1、近年來,微流控芯片具有多功能集成、處理速度快、消耗試劑少和可高通量同時處理多個樣品等優(yōu)點,因而在化學、生物、臨床、環(huán)境及公共安全的廣泛領域得到應用。同時,生物分子微陣列技術也因為可以高通量和高參數(shù)地分析生物、藥物或臨床樣品而獲得大量應用。兩者的結合,即蛋白質(zhì)陣列微流控芯片,可同時具有兩種技術的優(yōu)勢,既可處理復雜的生物或醫(yī)學體系,又可高選擇高參數(shù)地分析生物醫(yī)學樣品,成為新的生物或醫(yī)學的高效研究工具平臺。
　　 本論文圍繞具蛋白質(zhì)陣

2、列的不可逆封合微流控芯片制作方法進行研究,重點探索高精度蛋白質(zhì)陣列制作方法、制作過程蛋白質(zhì)活性保持等關鍵技術,具體研究內(nèi)容如下:
　　 1.探索和優(yōu)化了玻璃表面修飾和聚乙烯醇(PVA)犧牲層制作的工藝,同時考察了微流控制作過程中的溫度、臭氧活化工藝對所選用蛋白質(zhì)牛血清白蛋白(BSA)和明膠蛋白(Gelatin)結構和活性的影響,為蛋白質(zhì)陣列封合芯片的后續(xù)制作建立基礎。
　　 2.建立了微印章法,考察并優(yōu)化了濕潤度、聚二甲

3、基硅氧烷(PDMS)微結構等工藝參數(shù),在PDMS/玻璃微流控芯片中成功制作蛋白質(zhì)陣列,使用PVA膜保護蛋白陣列活性。
　　 3.建立了刻蝕法,考察并優(yōu)化了刻蝕功率、時間等工藝參數(shù),成功制作了蛋白質(zhì)陣列微流控芯片,并用于Hela細胞捕獲。
　　 4.提出并建立了金包被法,考察并優(yōu)化了金屬沉積、剝離等工藝參數(shù),成功制作了蛋白質(zhì)陣列微流控芯片,蛋白陣列圖案精度高,邊緣清晰。免疫反應測試和細胞貼附試驗表明,蛋白陣列在不可逆封合后

4、還具有很高的活性,捕獲的細胞陣列圖案清晰,可用于單細胞陣列的進一步研究。
　　 5.組建了細胞培養(yǎng)實驗室并建立了Hela細胞培養(yǎng)技術,考察了Hela細胞在BSA和Gelatin蛋白質(zhì)表面的吸附行為,及培養(yǎng)時間對細胞在蛋白表面貼附的影響。同時考察了Hela細胞在PDMS表面的吸附生長行為,發(fā)現(xiàn)細胞在PDMS表面可良好生長。
　　 6.建立了微流控芯片中Hela細胞培養(yǎng)技術,探索了剪切力、氣泡等對細胞生長的影響。