高良姜黃素促進大鼠頸動脈內(nèi)膜剝脫后內(nèi)皮修復(fù)及抑制內(nèi)膜增生的實驗研究.pdf

1、目的：頸動脈（carotid artery CA）斑塊是引發(fā)腦卒中的一大禍?zhǔn)?。頸動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)是切除增厚的頸動脈內(nèi)膜粥樣硬化斑塊，已被證明是預(yù)防由于斑塊脫落引起腦卒中的有效方法。內(nèi)皮細胞（endothelial cells ECs）修復(fù)和內(nèi)膜增生（intimal hyperplasia IH）與內(nèi)膜剝脫后的血管愈合情況密切相關(guān)，延遲性內(nèi)皮修復(fù)及內(nèi)膜的過度增生易導(dǎo)致內(nèi)膜剝脫后再狹窄及血栓的形成。高良姜黃素（Curcumin Cur）是綠茶

2、多酚的一種主要成分，已經(jīng)被證實了具有抗氧化，抗增殖，抗炎的生物學(xué)效應(yīng),被廣泛用于治療多種疾病，目前Cur在內(nèi)膜剝脫后內(nèi)皮修復(fù)及新生IH過程中的作用還未見報道。本實驗擬評估Cur在頸動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)預(yù)后中的作用及相關(guān)機制。
　　方法：首先，體外實驗，培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells HUVECs），分為溶劑對照組和Cur處理組（10μM）兩組，分別利用SRB法和劃痕實驗

3、檢測Cur對HUVECs存活率和遷移的影響；利用吖啶橙染色，western blot檢測自噬標(biāo)記蛋白LC3II和p62的水平，分析Cur對ECs自噬的影響。其次，體內(nèi)試驗，建立頸動脈球囊損傷模型。72只健康成年雄性SD大鼠隨機分為假手術(shù)組，內(nèi)膜損傷組，內(nèi)膜損傷+低劑量Cur（25 mg/kg）組，內(nèi)膜損傷+高劑量Cur（75 mg/kg）組4組，每組18只。內(nèi)膜損傷后6小時鼻飼Cur，連續(xù)三天，每天給藥一次。72小時后大鼠安樂死。利用H

4、E染色，對CAs行組織形態(tài)學(xué)分析；取CAs組織，檢測活性氧，丙二醛，超氧化物歧化酶，谷胱甘肽過氧化酶以及IL-1β、TNF-α和IL-6等炎癥因子的水平；利用TUNEL染色檢測細胞凋亡情況。
　　結(jié)果：體外實驗，與對照組相比，Cur可顯著提高 HUVECs的存活率，并促進HUVECs遷移； Cur顯著提高HUVECs中LC3-I向LC3-II的轉(zhuǎn)化，并降低了p62的蛋白水平，吖啶橙染色也顯示Cur促進HUVECs內(nèi)酸性區(qū)室的積累，

5、提示HUVECs內(nèi)的自噬水平升高。體內(nèi)試驗，Cur能顯著降低損傷血管ECs的凋亡率，氧化應(yīng)激，以及炎癥因子水平；Cur能夠有效的促進損傷血管組織中LC3-I向LC3-II的轉(zhuǎn)化，并顯著減低p62的水平。HE染色結(jié)果顯示頸動脈損傷后一周，雖然在顯微鏡下發(fā)現(xiàn)有局部的內(nèi)皮層損傷，但沒有觀察到明顯的內(nèi)膜增厚。損傷后4周，損傷節(jié)段血管可見明顯的內(nèi)膜增厚，血管腔狹窄，Cur可以有效地抑制血管內(nèi)膜增生，且高劑量的Cur效果較低劑量的Cur強。