葉酸偶聯(lián)殼聚糖載姜黃素-阿霉素納米粒的制備及研究.pdf

1、姜黃素是從傳統(tǒng)中藥姜黃中提取的一種天然植物多酚，已被證實(shí)具有逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的功效，與阿霉素聯(lián)合用藥可以提高阿霉素對腫瘤細(xì)胞的敏感性，從而逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥性。
　　根據(jù)葉酸受體在正常組織低水平表達(dá)而在某些腫瘤部位過度表達(dá)的特性，選擇生物相容性好、天然無毒、價廉易得，并且具有一定抗腫瘤活性的生物大分子殼聚糖作為藥物載體，阿霉素與姜黃素作為抗腫瘤藥物，利用葉酸受體及其配體的結(jié)合具有選擇性和特異性，將葉酸偶聯(lián)至殼聚糖后再與抗腫瘤藥物相結(jié)

2、合，通過葉酸受體的介導(dǎo)作用，增加藥物在病灶局部的濃度、提高療效、降低毒副作用，達(dá)到逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥及靶向給藥的目的。
　　通過離子凝聚法制備殼聚糖空白納米粒，通過紅外、粒徑分析和形態(tài)觀察對其進(jìn)行了表征，得到了粒徑200nm左右，形態(tài)規(guī)整，在溶液中可穩(wěn)定存在的納米粒子;討論了不同反應(yīng)條件對生成納米粒的影響，得出最優(yōu)反應(yīng)條件為:殼聚糖和TPP的濃度分別為2.5mg/mL和1mg/mL，反應(yīng)溫度25℃，攪拌速度500r/min，反應(yīng)體系

3、pH值為5.0～6.0。
　　分別建立了阿霉素和姜黃素體外高效液相分析方法，用于載藥納米粒中包封率和載藥量的計算。制備了殼聚糖載姜黃素納米粒和殼聚糖載雙藥納米粒，紅外光譜（IR）結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)中成功制備了殼聚糖載姜黃素納米粒和殼聚糖載雙藥納米粒，納米粒呈圓形，形態(tài)規(guī)整，粒徑在260nm左右，殼聚糖載雙藥納米粒中阿霉素的包封率和載藥量分別為87.5％和40.5％，姜黃素的包封率和載藥量分別為93.98％和43.3％。
　　以殼

4、聚糖為載體，葉酸為靶向受體，三聚磷酸鈉為聚陰離子，姜黃素與阿霉素為藥物模型，利用陰陽離子間的靜電相互作用，合成了葉酸偶聯(lián)殼聚糖納米粒和葉酸偶聯(lián)殼聚糖載雙藥納米粒。測得葉酸偶聯(lián)殼聚糖載雙藥納米粒粒徑390nm，zeta電位為+34.76mV，納米粒形態(tài)規(guī)整，大小均勻。檢測了葉酸偶聯(lián)殼聚糖納米粒中葉酸的含量，當(dāng)葉酸活性酯與殼聚糖分子上游離氨基的比例為1∶1時，每個殼聚糖上連接葉酸的量大致為38個。據(jù)文獻(xiàn)報道，在葉酸-蛋白質(zhì)偶聯(lián)物上平均一個蛋

5、白質(zhì)上偶聯(lián)3個葉酸分子已有較強(qiáng)的靶向性，說明該納米粒具有較強(qiáng)的腫瘤靶向作用。
　　以納米粒粒徑、阿霉素的包封率和載藥量、姜黃素的包封率和載藥量為指標(biāo)，響應(yīng)面法考察了殼聚糖濃度、TPP濃度、阿霉素濃度以及姜黃素濃度對各個響應(yīng)值的影響，得出殼聚糖濃度與TPP濃度在特定范圍內(nèi)才能形成較好的納米粒，濃度過低或過高都對反應(yīng)不利，阿霉素濃度過低或過高會導(dǎo)致阿霉素的載藥量與姜黃素的載藥量均下降，姜黃素濃度與姜黃素的包封率和載藥量成正比，與阿霉素