全外顯子測序發(fā)現(xiàn)進行性心臟傳導疾病新的致病基因PDYN突變.pdf

1、背景:
　　進行性心臟傳導疾病（PCCD）是一種罕見的遺傳起源的心臟傳導系統(tǒng)疾病，通常伴有家族聚集性。與其他類型的遺傳性心臟疾病相比，對進行性心臟傳導疾病的遺傳學研究相當有限。有研究報道進行性心臟傳導疾病與離子通道基因突變相關，最常見的是SCN5A基因，以及SCN1B、GJA5和TRPM4。此外，已經(jīng)報道了幾種與結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)相關的基因的突變與伴有或不伴有擴張型心肌病的心臟傳導異常有關，如LMNA、DES和Nkx2.5。進行性心臟傳導

2、疾病通常是進展性的，因此家系中心電圖正常的年輕成員可能處于患心律失常的風險中，并且隨著年齡的增長猝死的風險就越大。遺傳病的基因檢測在對識別隱匿性陽性突變攜帶者起重要作用，即攜帶的基因缺陷與有臨床表現(xiàn)的家系成員的基因缺陷相同，但目前無臨床癥狀的個人。遺傳測試結(jié)果陰性的患者則可以得到一定保證。
　　研究表明很多基因與心臟傳導障礙有關?，F(xiàn)在已經(jīng)明確的是心臟傳導缺陷不僅與老化相關，而且許多復雜的病理生理過程也參與房室和心室內(nèi)阻滯的發(fā)生。許

3、多基因都與心臟的電生理活動相關，以現(xiàn)在的技術(shù)水平并很可能僅鑒定了這些遺傳缺陷疾病中相關遺傳基因的一小部分。隨著科技水平的發(fā)展，在未來將可以確定更多更全面的致病的遺傳學改變，并進而確定由于遺傳缺陷導致的心臟傳導障礙的實際比例。而且遺傳學分析和檢測將成為PCCD患者常規(guī)臨床評估的一部分。由于這些心臟傳導障礙的出現(xiàn)是隨時間呈進行性改變的緩慢過程，遺傳學檢查可以有助于更好地確定心臟傳導缺陷發(fā)展的風險，并且因此確定起搏器植入的最佳時機。從長遠上來

4、看，早期識別出有可能發(fā)展為心臟傳導障礙疾病的患者，特別是存在陽性家族史的患者，可以預防性應用能夠延緩這些潛在致命性疾病發(fā)展的藥物。
　　目的:
　　探討一個進行性心臟傳導疾病家系的遺傳機制。
　　方法:
　　本研究的對象為一個包含4代34人的呈常染色體顯性遺傳的進行性心臟傳導疾病家系。通過全外顯子測序技術(shù)并結(jié)合Sanger測序進行驗證，在遺傳性心臟傳導疾病家系中選取3名患者的基因組DNA進行測序，篩選該家系的致病

5、突變基因。然后對所篩選到的突變位點進行生物信息學分析，并且應用SIFT、PolyPhen-2和Mutationtaster評分對突變位點進行致病性分析。對以上得到的候選突變位點用高分辨率溶解曲線法（HRM）和SNaPShot測序在家系外健康人中進行檢測，用Sanger測序法在家系成員內(nèi)檢測。對篩選出的致病基因在細胞水平上進行突變后的功能研究。
　　結(jié)果:
　　該家系進行性心臟傳導疾病的遺傳特點為常染色體顯性遺傳。經(jīng)過全外顯子

6、測序、生物信息學分析、公共數(shù)據(jù)庫篩查及突變功能預測篩選出8個候選突變位點。對家系內(nèi)以及家系外驗證，發(fā)現(xiàn)有 PDYN上的兩個雜合突變位點PDYN（c.581A>T，p.D194V）（c.580G>C，p.D194H）與心臟傳導疾病發(fā)生共分離。PDYN未被報道過與PCCD相關，且PDYN的兩個突變位點是未被報道過新發(fā)現(xiàn)的突變位點。轉(zhuǎn)染HEK293T細胞72小時后，PDYN mRNA表達量沒有變化。IL-6、IL-8、CRP和TNF-α的表達

7、在突變組均有升高，但突變組間沒有差異。ROS在突變組比對照組及野生組升高，但突變組間沒有差異。
　　結(jié)論:
　　1.本研究報道了一個包含7名患者34人的PCCD家系。在該PCCD家系中除傳導阻滯外同時還合并竇房結(jié)病變及房早、房速和房顫等房性心律失常。
　　2.本研究發(fā)現(xiàn)了PDYN上兩個新的雜合突變PDYN（c.581A>T，p.D194V）（c.580G>C，p.D194H）可能為該PCCD家系的致病突變位點。