高效氯氰菊酯降解菌的分離、鑒定及特性研究.pdf

1、從茶園、田地、桔園等常施用農藥的環(huán)境中采集多份土壤樣品，以高效氯氰菊酯為碳源構成選擇壓力，經液體搖瓶富集和多平板聯(lián)用兩種篩選程序，共篩選了280株微生物，獲得9株高效氯氰菊酯降解菌。高效氯氰菊酯降解菌培養(yǎng)6d后，對100 mg/L的底物，降解率均可達到60％左右；各菌株的菌落形態(tài)差異較大；經簡單染色、革蘭氏染色后觀察菌體形態(tài)為桿狀、短桿狀，均為革蘭氏陰性。挑選三株菌落形態(tài)有代表性的高效氯氰菊酯降解菌進行16S rDNA測序及比對，其中兩

2、株屬于假單胞菌屬（16S rDNA序列同源性為98％～99％），一株屬于根瘤菌屬（16S rDNA序列同源性為98％～99％）。根瘤菌屬微生物降解高效氯氰菊酯尚屬首次報道。將此菌株命名為CY22-7.3，并進一步研究其降解特性。 菌株CY22-7.3在無額外營養(yǎng)物質情況下，經100mg/L高效氯氰菊酯誘導，培養(yǎng)24 h后進入降解階段；培養(yǎng)6d后，降解了約60％的高效氯氰菊酯。在添加了外源營養(yǎng)物質（如，酵母提取物）后，降解率提升至

3、80％左右。菌株能耐受的底物濃度在200 mg/L～300 mg/L之間，對聯(lián)苯菊酯降解率較低；最佳的降解pH在6.0左右，較好的通氣條件能夠大幅度促進高效氯氰菊酯的降解；溫度適應范圍廣，20℃～30℃均能保持較強的降解能力。 經超聲波破碎提取胞內粗酶液；硫酸銨沉淀胞外蛋白，經透析除鹽后作為胞外粗酶液。兩者同時于30℃水浴中作用于50 mg/L高效氯氰菊酯8h，結果胞內粗酶液降解了約40％的高效氯氰菊酯，而胞外粗酶液降解了約6％