川芎嗪對大鼠急性脊髓損傷后GFAP表達的影響.pdf

1、目的:
　　觀察大鼠急性脊髓損傷后GFAP（膠質(zhì)纖維酸性蛋白，glial fibrillary acidic protein)在受損脊髓的不同時間點的表達變化，分析GFAP在脊髓內(nèi)源性神經(jīng)干細胞的增殖和分化過程中的作用機制,明確川芎嗪治療脊髓損傷的分子機制。
　　方法:
　　將SD大鼠隨機分為正常對照組(A組36只)、假手術(shù)組(B組36只)、模型組(C組36只),川芎嗪干預(yù)組(D組36只)。用改良Allen's法建立大

2、鼠急性脊髓損傷模型。D組在傷后每日2％鹽酸川芎嗪注射液腹腔注射，200 mg/kg（首次給藥在術(shù)后30 min)， A、B、C三組在同一時間給予等量生理鹽水。共10天。于造模后第8小時、1天、3天、7天、14天、28天進行斜板實驗、BBB評分神經(jīng)功能行為學(xué)評價。于造模后第8小時、1天、3天、7天、14天、28天每組分別處死6只大鼠,以脊髓受損處為中心上下長各約5mm取大鼠的脊髓進行HE染色、尼氏染色、免疫組化檢測。用 HE染色和尼氏染色

3、觀察脊髓的病理形態(tài)學(xué)變化,用免疫組化法檢測代表脊髓內(nèi)源性神經(jīng)干細胞的 Brdu+細胞和Nestin+細胞的表達,及GFAP在大鼠脊髓表達變化情況。對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析,并對Brdu+和Nestin+細胞、GFAP在脊髓中的表達進行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果:
　　1、大鼠造模損傷脊髓后,C組、D組大鼠的后肢運動功能顯著降低,脊髓功能嚴重損傷,大鼠在斜板上維持的最大角度與BBB評分均明顯降低,與 A組比較有顯著性差異（P<0.0

4、1)；D組大鼠治療后在斜板上維持的最大角度呈明顯上升趨勢,在第14天、28天與模型對照組對比有顯著差異(P<0.05)。D組大鼠在治療后BBB評分逐漸增加,在第3天、14天、28天與C組比較有顯著差異(P<0.01)；
　　2、通過大鼠脊髓組織切片進行 HE染色和尼氏染色觀察各組大鼠脊髓組織的病理學(xué)變化。脊髓損傷后可見受損脊髓水腫,局灶性出血,神經(jīng)元胞體皺縮、核固縮,尼氏小體開始減少和消失,神經(jīng)元變性,第3天后出現(xiàn)脊髓水腫加重,局

5、灶性出血范圍增大,炎性細胞浸潤明顯,灰質(zhì)部分組織溶解形成空泡；至第7天、14天壞死范圍進一步擴大,炎癥水腫逐漸減輕,至第28天,壞死區(qū)周圍瘢痕增生,向壞死區(qū)填充。川芎嗪能明顯減輕脊髓損傷后水腫、炎性細胞浸潤及出血程度,保護神經(jīng)細胞，促進脊髓組織修復(fù)；
　　3、脊髓損傷后,Brdu+細胞被激活,在脊髓中的表達明顯增多,在脊髓白質(zhì)、灰質(zhì)及中央管室管膜區(qū)均有表達。在第7天達到峰值,隨后逐漸減少。川芎嗪能明顯促進Brdu+細胞增殖,在損傷

6、后第7天、14天、28天，與C組比較有顯著差異(P<0.01)。川芎嗪能顯著促進Nestin+細胞表達，在第7天達到峰值,在損傷后第7天、14天、28天與C組比較有顯著性差異(P<0.01)；川芎嗪能顯著促進GFAP+細胞表達,在第7天達到峰值,在損傷后第7天、14天、28天與C組比較有顯著性差異(P<0.01)。
　　4、經(jīng)對GFAP表達、Nestin+細胞和 Brdu+細胞在脊髓中的表達數(shù)進行相關(guān)性分析,GFAP表達與Nest