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1、目的:通過(guò)對(duì)貴州省某三甲醫(yī)院下呼吸道感染患者下呼吸道分離培養(yǎng)的肺炎克雷伯菌(Klebsiella Pneumoniae, KP)所攜帶的β-內(nèi)酰胺酶基因型、耐藥表型以及分子流行病學(xué)特征的研究,為臨床治療相關(guān)感染提供理論指導(dǎo)依據(jù)。
方法:收集2015年1月1日-2016年2月29日間貴州省某三甲醫(yī)院各個(gè)病房下呼吸道感染患者痰培養(yǎng)的超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(Extended-spectumβ-lactamerses, ESBL)初篩陽(yáng)性
2、的KP菌株,根據(jù)美國(guó)臨床和微生物標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)推薦的雙紙片擴(kuò)散法確定ESBL表型后納入研究。應(yīng)用聚合酶聯(lián)反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction, PCR)擴(kuò)增常見(jiàn)的blaCTX-M/SHV/TEM三種ESBL基因,送測(cè)序公司雙向測(cè)序后在Genbank上BLAST比對(duì),確定KP菌株攜帶的基因型。同時(shí)使用全自動(dòng)微生物分析儀測(cè)
3、定KP菌株最低抑菌濃度(Minimal inhibitory concentration, MIC),明確產(chǎn)ESBL的KP菌株耐藥表型。
結(jié)果:
1、共收集貴州省某三甲醫(yī)院KP菌株155株,ESBL初篩陽(yáng)性菌株59株(59/155,38.1%),ESBL表型確證后45株(45/155,29.0%)納入研究。
2、通過(guò)回顧產(chǎn)ESBL的KP菌株臨床資料,29株(29/45,64.4%)來(lái)自于普通病房,16株(1
4、6/45,35.6%)來(lái)自重癥監(jiān)護(hù)病房(Intensive Care Unit, ICU),23株(23/45,51.1%)來(lái)自年齡超過(guò)60歲的患者,男女比例為32:13。
3、45株產(chǎn)ESBL的KP菌株均攜帶一種或兩種以上β-內(nèi)酰胺酶基因,其中僅發(fā)現(xiàn)1株單獨(dú)攜帶CTX-M型ESBL,其余均同時(shí)攜帶blaSHV+blaTEM或分別與blaSHV或blaTEM共同存在。45株(45/45,100%)KP菌株均攜帶有blaCTX-
5、M基因,另外9株(9/45,20%)攜帶兩種ESBL基因。
4、45株產(chǎn)ESBL KP菌株中,檢出blaCTX-M-14基因型最多(32/45,71.1%),其他還發(fā)現(xiàn)11株blaCTX-M-15(11/45,24.4%)、10株blaCTX-M-27(10/45,22.2%)、5株blaCTX-M-3(5/45,11.1%)、2株blaCTX-M-55(2/45,4.4%)、1株blaCTX-M-1(1/45,2.2%)、1
6、株blaCTX-M-65(1/45,2.2%)、5株blaSHV-136(5/45,11.1%)、2株blaSHV-27(2/45,4.4%)、1株blaSHV-12(1/45,2.2%)和1株blaSHV-38(1/45,2.2%)。
5、45株產(chǎn)ESBL的KP菌株對(duì)氨芐西林耐藥率達(dá)100%,對(duì)頭孢唑林耐藥率超過(guò)90%,對(duì)哌拉西林、頭孢吡肟、頭孢噻肟、復(fù)方新諾明、氨曲南的耐藥率超過(guò)70%。本研究中大多數(shù)(32/45,71.1
7、%)產(chǎn)ESBL菌株均表現(xiàn)為多重耐藥(Multi-drug Resistance, MDR),對(duì)大部分β-內(nèi)酰胺酶類(lèi)藥物具有高度耐藥性,對(duì)喹諾酮類(lèi)、氨基糖苷類(lèi)、大環(huán)類(lèi)脂類(lèi)等非β-內(nèi)酰胺酶類(lèi)抗生素的耐藥率也較高。對(duì)美羅培南、亞胺培南敏感性較高,耐藥率小于15%。
結(jié)論:
1、貴州省某三甲醫(yī)院流行的產(chǎn)酶KP菌株攜帶的ESBL基因型以blaCTX-M為主,其檢出率遠(yuǎn)超SHV酶及TEM酶,這與國(guó)內(nèi)主要流行趨勢(shì)相同。
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