低劑量X射線輻照(LDI)對(duì)周圍神經(jīng)橫斷損傷后神經(jīng)再生的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討低劑量X射線輻照（LDI）對(duì)周圍神經(jīng)橫斷損傷后神經(jīng)再生的影響及其作用機(jī)制。
　　方法：兩月齡 Sprague-Dawley雄性大鼠80只，體重200-250g，隨機(jī)分為輻照組（A組）、對(duì)照組（B組）兩組，每組40只，暴露大鼠左側(cè)坐骨神經(jīng)，顯微剪刀橫斷神經(jīng)后，由同一術(shù)者采用神經(jīng)外膜端端吻合法縫合修復(fù)離斷神經(jīng)，恢復(fù)神經(jīng)的連續(xù)性。術(shù)后24h內(nèi)A組予以1Gy劑量X線單次局部輻照，其余部位予鉛板防護(hù)。對(duì)照組不予以照射處理。術(shù)后每周

2、觀察大鼠步態(tài)、足部潰瘍、展爪反射等大體情況；術(shù)后第三天取左側(cè)大鼠坐骨神經(jīng)樣品，以RT-PCR、Western Blot法測(cè)VEGF表達(dá)結(jié)果；術(shù)后第2周取左側(cè)大鼠坐骨神經(jīng)，以 PCR、Western Blot法測(cè)GAP-43表達(dá)結(jié)果；術(shù)后第4、8、12周測(cè)定大鼠坐骨神經(jīng)功能指數(shù)；術(shù)后第12周測(cè)定神經(jīng)電生理從而評(píng)價(jià)神經(jīng)功能恢復(fù)情況；術(shù)后第12周行大體標(biāo)本、組織學(xué)和免疫組織學(xué)觀察；術(shù)后第12周行透射電鏡檢查觀察神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)變化。從大體形態(tài)、運(yùn)

3、動(dòng)功能、組織化學(xué)、超微結(jié)構(gòu)、電生理等檢測(cè)指標(biāo)來觀察電離輻照對(duì)周圍神經(jīng)橫斷傷后神經(jīng)再生修復(fù)和功能恢復(fù)的影響，以明確電離輻照對(duì)周圍神經(jīng)橫斷損傷后神經(jīng)再生及功能恢復(fù)的促進(jìn)作用，并通過檢測(cè)損傷周圍神經(jīng)中VEGF、GAP-43的表達(dá)，以進(jìn)一步探討電離輻照促進(jìn)周圍神經(jīng)再生修復(fù)及功能恢復(fù)的作用機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1、大體形態(tài)觀察：造模后兩組大鼠均出現(xiàn)左后肢癱瘓，足趾完全并攏，行走時(shí)左下肢呈拖行狀，輻照組大鼠足態(tài)恢復(fù)較對(duì)照組快；造模后第

4、1～2周，兩組大鼠左后足均出現(xiàn)足跟部潰瘍，輻照組第3～4周潰瘍開始愈合，早于對(duì)照組；造模后，針刺所有大鼠左后肢均無肢體回縮及展爪反射形成。輻照組肢體回縮及展爪反射開始恢復(fù)時(shí)間早于對(duì)照組，且較早恢復(fù)正常。
　　2、VEGF測(cè)定：造模后第三天，輻照組左側(cè)坐骨神經(jīng)內(nèi)VEGF表達(dá)明顯高于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　3、GAP-43測(cè)定：造模后第2周，輻照組左側(cè)坐骨神經(jīng)內(nèi)GAP-43表達(dá)明顯高于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

5、<0.01）。
　　4、坐骨神經(jīng)功能指數(shù)（SFI）：造模后2周內(nèi)，由于各組大鼠均出現(xiàn)左下肢拖行、左足完全并攏，各組SFI值無法測(cè)量計(jì)算。術(shù)后第4周到12周SFI逐漸恢復(fù)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，術(shù)后第4、8周，各組SFI較前均有所好轉(zhuǎn)，輻照組SFI恢復(fù)率優(yōu)于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　5、神經(jīng)電生理檢測(cè)：造模后第12周，輻照組運(yùn)動(dòng)神經(jīng)的波幅及傳導(dǎo)速度高于對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　6、組織學(xué)和免疫組

6、織學(xué)觀察：造模后第12周，輻照組軸突腫脹、髓鞘結(jié)構(gòu)與周圍組織粘連程度及S-100、NF-kb蛋白表達(dá)分布均優(yōu)于對(duì)照組。
　　7、透射電鏡觀察：造模后第12周，輻照組每高倍鏡視野下神經(jīng)纖維數(shù)量、軸突直徑、髓鞘形態(tài)、神經(jīng)纖維形態(tài)結(jié)構(gòu)均優(yōu)于對(duì)照組。
　　結(jié)論：周圍神經(jīng)損傷后早期應(yīng)用X線低劑量輻射治療有促進(jìn)周圍神經(jīng)損傷后再生的作用。其可能機(jī)制包括：1．LDI可增加神經(jīng)元細(xì)胞及雪旺氏細(xì)胞表達(dá) VEGF，促進(jìn)這些細(xì)胞遷移生長(zhǎng)和分裂增殖，