銅藻巖藻黃質(zhì)的制備及其抗氧化、免疫調(diào)節(jié)活性研究.pdf

1、本課題以銅藻為原料，利用有機(jī)溶劑萃取法分離出巖藻黃質(zhì)，主要研究了巖藻黃質(zhì)提取工藝的優(yōu)化、巖藻黃質(zhì)的抗氧化性和抗炎活性。主要研究成果如下：
　　1.巖藻黃質(zhì)提取、分離純化研究
　　通過單因素試驗(yàn)，探討了傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑提取法和超聲波輔助萃取法中各因素對(duì)銅藻中巖藻黃質(zhì)提取率的影響，再采用正交試驗(yàn)優(yōu)化提取方案：常規(guī)有機(jī)溶劑浸提法中當(dāng)工藝條件為溶劑70％乙醇、溫度70℃、液料比68mL/g、時(shí)間127min時(shí)，提取率可達(dá)最高為0.72

2、mg/g；超聲輔助萃取的最優(yōu)工藝參數(shù)：70℃的初始溫度、50ml/g的液料比、50min的處理時(shí)間，提取率為0.70mg/g(干重)。提取得到的巖藻黃質(zhì)乙醇溶液通過石油醚萃取進(jìn)行分離純化。
　　2.巖藻黃質(zhì)體外抗氧化活性研究
　?。?）測定巖藻黃質(zhì)對(duì)自由基的清除能力和還原能力，研究結(jié)果表明，巖藻黃質(zhì)具有較強(qiáng)的抗氧化能力，當(dāng)濃度為0.05mg/ml時(shí)，DPPH清除率可以達(dá)到93.6%，超氧陰離子清除率為77.5%，羥基自由基清

3、除率達(dá)到84.8%，還原力2.2，并呈劑量依賴性。（2）以雙氧水處理RAW264.7巨噬細(xì)胞建立氧化應(yīng)激細(xì)胞模型，對(duì)巖藻黃質(zhì)保護(hù)細(xì)胞氧化損傷的作用機(jī)理進(jìn)行初步研究。采用MTT法測定細(xì)胞存活率，結(jié)果表明，與雙氧水單獨(dú)作用比較，20μmol/L巖藻黃質(zhì)預(yù)處理24h能明顯緩解過氧化氫對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用；利用試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶、細(xì)胞因子水平，結(jié)果顯示，巖藻黃質(zhì)可以顯著提高細(xì)胞內(nèi)SOD和GSH-Px的水平，并顯著降低LDH和NO的釋放量。

4、總之，巖藻黃質(zhì)是一種強(qiáng)效的抗氧化劑。
　　3.巖藻黃質(zhì)對(duì)RAW264.7細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用研究
　　通過建立四個(gè)模型，分別研究巖藻黃質(zhì)單獨(dú)作用對(duì)細(xì)胞因子的影響、在細(xì)胞發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí)對(duì)細(xì)胞因子調(diào)節(jié)能力以及巖藻黃質(zhì)對(duì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的保護(hù)作用和修復(fù)作用。結(jié)果表明，巖藻黃質(zhì)單獨(dú)作用于細(xì)胞時(shí)，與空白組比較，巖藻黃質(zhì)可顯著提高細(xì)胞因子 IL-6、IL-10和 TNF-α水平，但又小于脂多糖（LPS）組水平，且差異顯著（P<0.05）；在炎癥