芍藥內(nèi)酯苷臨床前藥代動力學(xué)研究.pdf

1、芍藥內(nèi)酯苷（Albiflorin）又名白芍苷是毛茛科（Ranunculaceae）植物芍藥（Paeonialacti flora Pall.）或赤芍（Paeoniaveitchii Lynch.）的干燥根提取物，屬于單萜類化合物。有研究證明，芍藥內(nèi)酯苷具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗驚厥作用，調(diào)節(jié)免疫力，舒張平滑肌，抗炎等作用，此外其還有殺滅病原微生物和保護(hù)肝臟的作用。芍藥內(nèi)酯苷理作用廣泛，近年來最新研究發(fā)現(xiàn)，芍藥內(nèi)酯苷具有抗抑郁作用，可促進(jìn)睡眠、保

2、護(hù)腦神經(jīng)，其藥理活性甚至超過了中藥白芍中的主要成分芍藥苷。所以，該化合物具有良好的開發(fā)前景，現(xiàn)擬申報(bào)一類新藥。本研究工作旨在研究芍藥內(nèi)酯苷的藥代動力學(xué)特性，為該化合物的臨床研究以及劑型研發(fā)提供初步依據(jù)。
　　目的：對芍藥內(nèi)酯苷的藥代動力學(xué)特性進(jìn)行較為全面的研究，獲得其吸收、分布、排泄以及代謝酶的相關(guān)數(shù)據(jù)。
　　方法：利用 LC-MS/MS技術(shù)對芍藥內(nèi)酯苷的生物樣品進(jìn)行檢測，分析其血藥濃度、組織藥物濃度、排泄物藥物濃度等。通過

3、計(jì)算得到芍藥內(nèi)酯苷的藥代動力學(xué)參數(shù)。利用體外肝微粒溫孵技術(shù)，確定芍藥內(nèi)酯苷是否被細(xì)胞色素P450各個(gè)亞型所代謝，以及是否對細(xì)胞色素P450各個(gè)亞型有抑制或誘導(dǎo)作用。利用體外Caco-2細(xì)胞模型技術(shù)，研究芍藥內(nèi)酯苷的吸收特性。
　　結(jié)果：建立了一種靈敏度高、專屬性強(qiáng)、簡單、快速的檢測ICR小鼠和Beagle犬生物樣品中芍藥內(nèi)酯苷分析方法。利用 LC-MS/MS技術(shù)，直接沉淀蛋白法，進(jìn)行生物樣品的測定。生物基質(zhì)不干擾芍藥內(nèi)酯苷的測定，

4、經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，芍藥內(nèi)酯苷的在1~1000 ng/mL線性范圍良好，最低定量下限為1 ng/mL；該方法的日間和日內(nèi)精密度小于（RSD）小于12％，方法準(zhǔn)確度在93~107%之間，回收率在85%以上。
　　小鼠單劑量口服芍藥內(nèi)酯苷（3.5 mg/kg、7 mg/kg、14 mg/kg）后于不同時(shí)間點(diǎn)從眼底靜脈叢快速準(zhǔn)確取血后，采用上述 LC-MS/MS方法進(jìn)行血藥濃度檢測，并繪制出血藥濃度-時(shí)間曲線，采用DAS2.0非房室模型法計(jì)算

5、藥物的藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果表明，ICR小鼠在服用芍藥內(nèi)酯苷后吸收和消除較快，在10 h左右消除完全消除，三個(gè)劑量組的Cmax、AUC（0-∞）均與劑量呈線性相關(guān)，符合一級消除動力學(xué)。
　　ICR小鼠單劑量給藥7 mg/kg后在10 min、1 h、6 h立即頸椎脫臼處死，測得各組織中藥物濃度。結(jié)果表明在10 min時(shí)各組織已均有芍藥內(nèi)酯苷分部，除腸、胃、腎外其余組織含量均較低；1h時(shí)各組織含藥濃度基本達(dá)峰；6h時(shí)各組織含藥濃度均顯

6、著降低。所以，芍藥內(nèi)酯苷在各器官內(nèi)無藥物蓄積情況。
　　Beagle犬單劑量口服芍藥內(nèi)酯苷（0.5 mg/kg、1 mg/kg、2 mg/kg）后測得藥物的藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果表明，比格犬在服用芍藥內(nèi)酯苷后吸收和消除較快，在10 h左右消除完全消除，三個(gè)劑量組的Cmax、AUC（0-∞）均與給藥劑量呈線性相關(guān)，符合一級消除動力學(xué)。
　　Beagle犬在連續(xù)十天（每天口服一次）口服芍藥內(nèi)酯苷1 mg/kg，通過服藥前監(jiān)控血藥濃

7、度發(fā)現(xiàn)，在服藥前芍藥內(nèi)酯苷在比格犬體內(nèi)已經(jīng)基本消除完全；通過最后一次給藥后計(jì)算的藥代動力學(xué)參數(shù)與單劑量給藥的藥代動力學(xué)參數(shù)相比較，發(fā)現(xiàn)多次給藥與單次給藥的藥代動力學(xué)參數(shù)無差異。結(jié)果表明芍藥內(nèi)酯苷在多次服用時(shí)無藥物蓄積現(xiàn)象。
　　利用體外溫孵技術(shù)，將芍藥內(nèi)酯苷與細(xì)胞色素P450各亞型及人肝原代細(xì)胞孵育，結(jié)果發(fā)現(xiàn)芍藥內(nèi)酯苷對P450酶各亞型和人肝原代細(xì)胞無誘導(dǎo)和抑制作用。
　　利用 Caco-2細(xì)胞模型，考察芍藥內(nèi)酯苷的吸收機(jī)制