MET、EGFR在不同基因類型乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、研究背景：
　　乳腺癌是當(dāng)前嚴(yán)重危害女性身心健康的惡性腫瘤之一，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，影響因素較多。隨著人們生活方式、環(huán)境等改變，我國(guó)乳腺癌的發(fā)病率顯著增加，并呈年輕化的趨勢(shì)。由于乳腺癌的異質(zhì)性，病人在治療反應(yīng)、預(yù)后等方面存在明顯差異。伴隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，人們將這種差異歸因于基因水平的差異。近年來(lái)尋找新的分子標(biāo)記物為乳腺癌病人提供更好的個(gè)體化治療是目前研究的熱點(diǎn)。
　　MET（Mesenchymal-epithelialtra

2、nsition）基因位于7q31，屬于酪氨酸激酶家族成員，其配體為HGF(Hepatocytegrowthfactor)。MET與配體結(jié)合后引起受體激酶區(qū)域的二聚化和胞質(zhì)的自動(dòng)磷酸化，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的激活。MET信號(hào)通路在維持正常組織的生理功能中發(fā)揮重要的作用，包括胚胎的發(fā)育、血管的形成、細(xì)胞的生長(zhǎng)和傷口的愈合。MET基因的異常還與腫瘤的發(fā)生有關(guān)，如乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、胃癌、食管癌、子宮內(nèi)膜癌、肝癌、結(jié)直腸癌和腎癌。在癌的發(fā)生發(fā)展

3、中HGF/MET的激活可以導(dǎo)致侵襲、增值、血管新生。異常HGF/MET信號(hào)通路的激活與腫瘤的惡性程度和預(yù)后不良密切相關(guān)。研究表明MET通過(guò)與其他通路間的相互作用在獲得性耐藥中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，如酪氨酸激酶家族特別是EGFR。
　　表皮生長(zhǎng)因子受體EGFR（Epidermalgrowthfactorreceptor）是原癌基因c-erbB-1的產(chǎn)物，位于7p11-13,屬于表皮生長(zhǎng)因子受體家族的四個(gè)成員之一。由胞內(nèi)區(qū)（酪氨酸激酶區(qū)域）

4、，短的跨膜區(qū)、膜旁區(qū)和酪氨酸激酶配體活躍的胞外區(qū)域（配體結(jié)合域）組成。EGFR能夠被大量的生長(zhǎng)因子配體激活包括表皮生長(zhǎng)因子（EGF）和轉(zhuǎn)換生長(zhǎng)因子α（TGF-α）。EGFR與配體的結(jié)合導(dǎo)致酪氨酸激酶殘基的磷酸化，引起下游信號(hào)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。表皮生長(zhǎng)因子酪氨酸殘基配體依賴區(qū)域的激活作為信號(hào)感應(yīng)器和調(diào)節(jié)蛋白的結(jié)合位點(diǎn)來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)基質(zhì)的信號(hào)流程。磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）和AKT通路，RAS/MAPK通路是主要的信號(hào)機(jī)制，其主要的生物作用包括細(xì)

5、胞增殖，生存，血管生成和抑制凋亡研究證實(shí)，在許多的惡性腫瘤中出現(xiàn)EGFR的過(guò)表達(dá)現(xiàn)象。
　　在胰腺癌，非小細(xì)胞肺癌的研究中發(fā)現(xiàn)MET與EGFR在通路上存在復(fù)雜的交互作用，共同參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、和轉(zhuǎn)移，但是二者在乳腺癌中的表達(dá)情況目前的文獻(xiàn)中報(bào)道甚少。本實(shí)驗(yàn)用免疫組化IHC（Immunohistochemistry）和熒光原位雜交FISH（Fluorescenceinsituhybridization）方法檢測(cè)不同基因類型的乳腺

6、癌組織中MET基因、EGFR基因蛋白表達(dá)和基因擴(kuò)增的情況。初步探討二者與乳腺癌基因分型、臨床病理指標(biāo)的關(guān)系以及二者之間的相關(guān)性。
　　材料與方法：
　　研究對(duì)象：
　　收集鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2011年至2015年經(jīng)外科手術(shù)切除，病理診斷為乳腺癌的病例100例。所有病例術(shù)前均未接受放療、化療、內(nèi)分泌治療。手術(shù)方式包括乳腺癌根治術(shù)，改良根治術(shù)，保乳+腋下淋巴結(jié)清掃。根據(jù)病理報(bào)告中ER、PR、HER-2、Ki-67的

7、表達(dá)情況對(duì)乳腺癌病例進(jìn)行分型。
　　方法：
　　采用免疫組織化學(xué)鏈霉親和素-過(guò)氧化物酶法（SP法）和熒光原位雜交（FISH法）檢測(cè)MET和EGFR在乳腺癌組織中的表達(dá)情況。統(tǒng)計(jì)分析運(yùn)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，用非參數(shù)檢驗(yàn)中Kruskal-WallisH檢驗(yàn)（秩和檢驗(yàn)）分析乳腺癌各型中MET和EGFR的表達(dá)情況，用Spearman方法分析MET基因和EGFR基因之間的相關(guān)性，Mann-whitneyU秩和檢驗(yàn)分析MET、

8、EGFR與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、MET蛋白在乳腺癌中陽(yáng)性率為20％。不同基因類型中的陽(yáng)性率分別為：管腔A型13%，管腔B型0%，基底細(xì)胞樣型52%，HER-2過(guò)表達(dá)型10%。MET蛋白的表達(dá)與基因分型有關(guān)P＜0.05，主要表達(dá)在基底細(xì)胞樣型乳腺中。
　　2、EGFR蛋白在乳腺癌中的陽(yáng)性率為17%。不同基因類型中的陽(yáng)性率分別為：管腔A型0%，管腔B型中陽(yáng)性率為0%，基底

9、細(xì)胞樣型63%，在HER-2過(guò)表達(dá)型0%。EGFR蛋白的表達(dá)與基因分型有關(guān)（P＜0.05），主要表達(dá)在基底細(xì)胞樣型乳腺癌。
　　3、MET蛋白和EGFR蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)r=0.572，P＜0.05
　　4、在乳腺癌中MET基因擴(kuò)增15例，陽(yáng)性率為15%。其中在HER-2過(guò)表達(dá)型和管腔B型乳腺癌未見基因擴(kuò)增；在管腔A型中擴(kuò)增2例（陽(yáng)性率5%）；在基底細(xì)胞樣型中擴(kuò)增13例（陽(yáng)性率48%），MET基因的擴(kuò)增與基因分型有關(guān)（P＜0

10、.05），主要在基底細(xì)胞樣型乳腺癌中。
　　5、EGFR在乳腺癌中擴(kuò)增14例，陽(yáng)性率為14%。其中在管腔A型、HER-2過(guò)表達(dá)型、管腔B型中未見擴(kuò)增。在基底細(xì)胞樣型中擴(kuò)增14例（陽(yáng)性率為52%），EGFR基因擴(kuò)增與基因分型有關(guān)（P＜0.05），主要在基底細(xì)胞樣型乳腺癌中。
　　6、MET基因的擴(kuò)增與EGFR基因的擴(kuò)增具有相關(guān)性，r=0.686，P＜0.05。
　　7、MET基因的擴(kuò)增與MET蛋白表達(dá)正相關(guān)，r=0.70

11、1，P＜0.05。
　　8、EGFR基因的擴(kuò)增與EGFR蛋白表達(dá)正相關(guān)，r=0.928，P＜0.05。
　　9、MET基因與患者的年齡、絕經(jīng)情況、腫瘤的大小、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級(jí)無(wú)關(guān)P＞0.05，與TNM分期有關(guān)P＜0.05。
　　10、EGFR基因與患者的年齡、絕經(jīng)情況、腫瘤的大小、組織學(xué)分級(jí)無(wú)關(guān)P＞0.05，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)P＜0.05。
　　結(jié)論：
　　MET基因和EGFR基因的表達(dá)