Sulfiredoxin基因敲低對HeLa細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響.pdf

1、目的：探討干擾Sulfiredoxin（Srx）基因表達(dá)對宮頸癌HeLa細(xì)胞惡性生物行為學(xué)的影響。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)選取宮頸癌HeLa細(xì)胞株，分為Wild-Type（WT）組， Non-Target（NT）組，Knock-Down（KD）組。利用siRNA技術(shù)干擾Srx在HeLa細(xì)胞中的內(nèi)源性表達(dá)，利用Real-Time PCR及Westernbolt鑒定干擾效果。首先，利用DCFH-DA標(biāo)記的熒光探針測定干擾Srx表達(dá)后對HeL

2、a細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響，而后分別采用MTT法、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、transwell實(shí)驗(yàn)及流式細(xì)胞術(shù)分別檢測三個不同處理組HeLa細(xì)胞增殖力，體外成瘤能力，浸潤、遷移能力，細(xì)胞周期及凋亡率。最后采用小管形成實(shí)驗(yàn)及血管擬態(tài)實(shí)驗(yàn)觀察干擾Srx后對內(nèi)皮細(xì)胞血管形成能力的影響。
　　結(jié)果：與兩對照組比較，KD組HeLa細(xì)胞Srx表達(dá)在mRNA和蛋白質(zhì)水平均顯著被抑制。KD組細(xì)胞內(nèi)ROS水平及凋亡率顯著增加（P<0.05），細(xì)胞增殖力，體外