膿毒癥心功能障礙的臨床與實驗研究.pdf

1、目的：本研究分析膿毒癥時新發(fā)生心律失常的誘因、主要類型及對預(yù)后的影響;研究膿毒癥心功能障礙時中性粒細胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白在血及尿中的改變以及在膿毒癥心肌損害中的診斷價值;探討膿毒癥心肌線粒體損傷、NLRP3炎癥小體活化致心功能障礙的機制，以及不同劑量烏司他丁干預(yù)治療對心功能的影響。
　　方法：第一部分收集2012年12月至2014年4月ICU內(nèi)共748例患者的臨床資料，應(yīng)用SPSS統(tǒng)計軟件分析心律失常的誘因、主要類型及對預(yù)后的影響

2、。第二部分留取膿毒癥患者入院4小時內(nèi)血及尿標本，患者及正常對照組血標本立即送檢化驗?zāi)X鈉肽(BNP)。通過實時定量PCR法檢測心功能不全組、非心功能不全組及健康對照組外周血單個核細胞NGAL的mRNA表達，采用ELISA方法檢測心功能不全組、非心功能不全組及健康對照組血漿中及尿中NGAL的蛋白表達，比較組間差異。第三部分雄性清潔Wistar大鼠65只，分為空白對照組、假手術(shù)組、盲腸結(jié)扎穿孔組、烏司他丁干預(yù)組，制作大鼠膿毒癥模型，分別給予小

3、劑量及大劑量烏司他丁干預(yù)治療。造模48小時后觀察各組大鼠左室心肌病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)改變;ELISA法檢測各組大鼠外周血中肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、B型腦鈉肽(BNP)、TNF-α和IL-1β的變化;通過RT-PCR檢測左室心肌細胞中NLRP3和caspase-1的mRNA表達，Western blot法檢測各組左室心肌細胞中NLRP3和caspase-1蛋白的表達，比較組間差異。
　　結(jié)果：第一部分ICU內(nèi)心律失常的發(fā)生率為18.85

4、％，心律失常的主要危險因素包括年齡、急診手術(shù)、膿毒癥、急性呼吸窘迫綜合征、心血管疾病和電解質(zhì)紊亂、機械通氣、應(yīng)用血管活性藥物、入ICU時較高的APACHEⅡ評分。膿毒癥是主要危險因素(43.26％)，房顫是膿毒癥患者最常見的心律失常。膿毒癥新發(fā)生心律失常組患者的病死率為29.50％，而無心律失常組13.66％(p＜0.01)，膿毒癥存活患者中心律失常組患者的ICU住院天數(shù)明顯長于無心律失常組(17.10±9.30vs11.25±5.50

5、，p＜0.01)。第二部分非心功能不全組、心功能不全組與對照組相比血及尿中NGAL mRNA及蛋白表達均有顯著性差異，P＜0.05;心功能不全組與非心功能不全相比血中NGAL mRNA表達無顯著性差異，P＞0.05;血中及尿中蛋白表達有顯著性差異，P＜0.05。第三部分膿毒癥大鼠血清中cTnⅠ、BNP、TNF-α、IL-1β均明顯升高;組織學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)，CLP組大量心肌細胞水腫、壞死、炎性細胞浸潤及線粒體水腫、結(jié)構(gòu)破壞。免疫組化顯示膿毒癥

6、模型中大鼠心肌NLRP3和caspase-1均表達增強，實時定量PCR技術(shù)及免疫印跡技術(shù)顯示NLRP3和caspase-1的mRNA及蛋白表達均增強，且與cTnⅠ、BNP、TNF-α、IL-1β水平相關(guān)。小劑量UTI干預(yù)組及大劑量UTI干預(yù)組心肌損傷標志物水平、炎癥介質(zhì)水平、組織病變程度、NLRP3和caspase-1的mRNA表達及蛋白表達均比CLP組改善，且大劑量UTI干預(yù)組的病理改變輕，NLRP3和caspase-1的mRNA表達

7、及蛋白表達弱于小劑量UTI干預(yù)組。
　　結(jié)論：1.膿毒癥是ICU內(nèi)心律失常發(fā)生的主要危險因素，房顫是膿毒癥誘發(fā)的心律失常的主要類型，心律失常增加了ICU患者的ICU住院天數(shù)及死亡風(fēng)險。
　　2.膿毒癥患者血BNP升高，心功能不全時血中BNP升高更明顯。膿毒癥患者存在血及尿NGAL升高，心功能不全時血中NGAL升高更明顯，且與BNP成正相關(guān)，NGAL可做為心肌損害的標記物，與其他心臟標記物聯(lián)合應(yīng)用。
　　3.膿毒癥時大鼠