活性維生素D3對(duì)UUO大鼠腎間質(zhì)TGF-β1-Smads信號(hào)軸核酸表達(dá)的影響.pdf

1、目的：腎小管間質(zhì)纖維化是大多數(shù)腎臟疾病發(fā)展致終末期腎衰的共同病理特征之一。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)作為重要的致纖維化因子，在腎小球疾病和腎小管間質(zhì)病變發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。1,25-(OH)2D3是體內(nèi)維生素D分別經(jīng)過(guò)肝、腎羥化作用后的活性形式，除具有經(jīng)典的調(diào)節(jié)鈣磷代謝和骨礦化作用外，其在腎組織中還具有阻止上皮細(xì)胞向間質(zhì)轉(zhuǎn)分化、抑制炎癥反應(yīng)、抑制腎素血管緊張素系統(tǒng)和改善胰島素抵抗等作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶

2、鏈反應(yīng)(RT-PCR)法，檢測(cè)單側(cè)輸尿管結(jié)扎所致的幼年大鼠腎間質(zhì)纖維化（UUO）模型中TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表達(dá)趨勢(shì)及所測(cè)各指標(biāo)間的相關(guān)性，以及應(yīng)用活性維生素D3干預(yù)后各指標(biāo)的變化情況，并評(píng)價(jià)活性維生素D3對(duì)腎間質(zhì)纖維化的保護(hù)作用。
　　方法：選取3-4周齡幼年SD雄性大鼠54只，隨機(jī)均分為三組，分別為假手術(shù)組、UUO模型組、活性維生素D3干預(yù)組，每組各18只，模型組和干預(yù)組采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎法制備腎間質(zhì)纖

3、維化模型，假手術(shù)組只分離不結(jié)扎輸尿管。術(shù)后第一天起，干預(yù)組給予活性維生素D3(0.1ug/kg?d)溶于0.2ml花生油中灌胃，假手術(shù)組和模型組給予等量花生油灌胃，灌胃滿(mǎn)3、7、14天后每組隨機(jī)選取6只大鼠處死，留取左腎組織，采用RT-PCR法檢測(cè)各組腎組織中TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表達(dá)趨勢(shì)，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以X±s表示，采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:1.采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)制備腎間質(zhì)纖

4、維化模型成功，結(jié)扎側(cè)腎臟體積明顯變大，皮質(zhì)變薄。2.采用RT-PCR法檢測(cè)各組各時(shí)間點(diǎn)腎組織中TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表達(dá)情況：假手術(shù)組：TGF-β1和Smad3mRNA僅有少量基礎(chǔ)表達(dá)，Smad7mRNA有豐富的表達(dá)，各時(shí)間點(diǎn)組內(nèi)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。UUO模型組：隨著梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)，腎組織中TGF-β1和Smad3mRNA表達(dá)顯著性增加，Smad7mRNA表達(dá)逐漸減少，組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)比較差異有顯

5、著性（P<0.01）；與假手術(shù)組相比，腎組織TGF-β1和Smad3mRNA的表達(dá)有所增加，Smad7mRNA的表達(dá)有所減少，同時(shí)間點(diǎn)組間比較差異有顯著性（P<0.01）。活性維生素D3干預(yù)組：隨著梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)，TGF-β1mRNA、Smad3mRNA的表達(dá)逐漸減少，而Smad7mRNA的表達(dá)呈增高趨勢(shì)，組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)比較差異有顯著性（P<0.01）；TGF-β1mRNA、Smad3mRNA的表達(dá)仍高于假手術(shù)組，低于UUO模型組，而Sm

6、ad7mRNA的表達(dá)低于假手術(shù)組，高于UUO模型組，組間同時(shí)間點(diǎn)相比差異有顯著性(P<0.01)。3.相關(guān)性分析：UUO模型組中Smad3與TGF-β1成正相關(guān)關(guān)系（r=0.927）；Smad7與TGF-β1比成負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.960）；Smad3與Smad7成負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.924）。
　　結(jié)論：1.在幼年大鼠腎間質(zhì)損傷過(guò)程中，TGF-β1/Smads信號(hào)通路可能具有重要調(diào)控作用，其中TGF-β1、Smad3起促進(jìn)損