脂聯(lián)素對(duì)膿毒癥大鼠肝功能障礙的保護(hù)作用.pdf

1、目的：采用盲腸結(jié)扎穿孔法（CLP）制備大鼠膿毒癥模型，然后給予外源性重組脂聯(lián)素對(duì)模型大鼠進(jìn)行干預(yù)，動(dòng)態(tài)觀察脂聯(lián)素對(duì)膿毒癥大鼠干預(yù)后不同手術(shù)時(shí)間點(diǎn)血清降鈣素原(PCT)、肝功能標(biāo)記物（ALT、AST、TBIL）及肝組織中炎癥因子（TNF-α、IL-6）變化的影響，并對(duì)接受干預(yù)后的模型大鼠肝臟病理變化和形態(tài)變化進(jìn)行記錄分析，探討脂聯(lián)素干預(yù)對(duì)膿毒癥大鼠肝功能障礙的保護(hù)作用，并進(jìn)一步闡述其可能作用機(jī)制。
　　方法：通過(guò)隨機(jī)數(shù)字表法將清潔健

2、康Wistar待實(shí)驗(yàn)大鼠54只，雌雄不拘，隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham）、膿毒癥組（CLP）及脂聯(lián)素干預(yù)組（APN+CLP），每組18只，每個(gè)大組大鼠根據(jù)實(shí)驗(yàn)觀察時(shí)間點(diǎn)再隨機(jī)分為（3h、6h、12h）3個(gè)亞組，每組各6只。Sham組大鼠無(wú)菌剖腹后，分離盲腸，翻動(dòng)盲腸，原位回納后關(guān)腹，不對(duì)其行盲腸結(jié)扎及穿刺術(shù)，其余兩組大鼠采用盲腸結(jié)扎和穿刺術(shù)制備膿毒癥模型，APN+CLP組大鼠CLP模型成功建立后立即行腹腔注射脂聯(lián)素600ug/100g。C

3、LP模型建立完成后，分別于術(shù)后3h、6h、12h采集血標(biāo)本，用于檢測(cè)血清降鈣素原（PCT）、肝功能標(biāo)記物（ALT、AST、TBIL）及肝組織中炎癥因子TNF-α、IL-6水平。各觀察時(shí)間點(diǎn)采血后立即處死大鼠，無(wú)菌取出完整肝臟，經(jīng)蘇木精-伊紅（HE）染色后顯微鏡下觀察肝臟病理形態(tài)變化。實(shí)驗(yàn)所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（-x±s）表示，兩組之間采用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較，兩組以上之間采用單因素方差分析（One-way

4、 ANOVA）進(jìn)行比較，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，反之則P>0.05。
　　結(jié)果：各組大鼠術(shù)后不同觀察時(shí)間點(diǎn)血清肝功能標(biāo)記物（ALT、AST、TBIL）變化：CLP組和APN+CLP組各觀察時(shí)間點(diǎn)血清ALT、AST、TBIL濃度呈現(xiàn)逐漸升高趨勢(shì)，與Sham組相比，結(jié)果存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），但APN+CLP組各觀察時(shí)間點(diǎn)血清肝功能標(biāo)記物濃度較CLP組均明顯下降（P<0.05）；各組大鼠不同觀察時(shí)間點(diǎn)血清降鈣素原（P

5、CT）濃度變化：CLP組和APN+CLP組在術(shù)后3h血清PCT水平即有所升高，但與Sham組相比差異無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），觀察至CLP術(shù)后6h才顯著高于Sham組（P<0.05），術(shù)后12h仍持續(xù)升高，但APN+CLP組術(shù)后6h、12h血清PCT濃度較CLP組均顯著降低（P<0.05）；各組大鼠肝組織炎癥因子（TNF-α、IL-6）水平變化：與Sham組相比，CLP組和APN+CLP組各觀察時(shí)間點(diǎn)肝組織炎癥因子水平均明顯升高

6、，結(jié)果存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），但APN+CLP組各觀察時(shí)間點(diǎn)較CLP組均明顯降低（P<0.05），除Sham組外，其余兩組大鼠肝組織炎癥因子均在術(shù)后6h達(dá)高峰，術(shù)后12h稍回落。各組大鼠不同觀察時(shí)間點(diǎn)肝組織病理結(jié)構(gòu)變化：3h組織變化：Sham組肝細(xì)胞排列整齊規(guī)律，肝細(xì)胞形態(tài)一致，多呈多邊形，胞核多分布于細(xì)胞中心，呈圓形，胞質(zhì)均勻無(wú)雜質(zhì)；CLP組尚可觀察到正常肝小葉結(jié)構(gòu)，偶見(jiàn)細(xì)胞核固縮、溶解、破裂現(xiàn)象，個(gè)別細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)到含鐵血黃素顆

7、粒沉積；APN+CLP組肝臟損傷較CLP組稍減輕，但不明顯；術(shù)后12h肝組織可見(jiàn)如下形態(tài)變化，Sham組肝臟病理形態(tài)與術(shù)后3h對(duì)比無(wú)明顯變化，CLP組肝臟病理結(jié)構(gòu)出現(xiàn)了明顯異常改變，肝細(xì)胞大小不均，排列極不規(guī)律，部分細(xì)胞可見(jiàn)腫脹變性，甚至各別細(xì)胞出現(xiàn)壞死，可見(jiàn)多個(gè)細(xì)胞胞核固縮、溶解、破裂現(xiàn)象，甚至可見(jiàn)肝細(xì)胞再生現(xiàn)象，有的細(xì)胞胞核出現(xiàn)雙核變，APN+CLP組肝組織結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常，較CLP組比較病理改變顯著減輕，但仍可見(jiàn)不同程度的病變；術(shù)