?；撬釋χ匦湍X創(chuàng)傷大鼠腦代謝及線粒體作用研究.pdf

1、目的:本課題主要研究牛磺酸對腦創(chuàng)傷后腦組織代謝、線粒體呼吸功能、線粒體活性氧(reactive oxygen species，ROS)生成及ATP合成速率的影響情況。
　　 方法:將48只雄性SD大鼠隨機(jī)分為:假手術(shù)組（sham）、腦創(chuàng)傷組(TBI)及?；撬嶂委熃M(TAU)，每組16只。TBI組和TAU組用液壓打擊儀制作左側(cè)腦創(chuàng)傷模型（左側(cè)前囟后4.5mm，矢縫旁開2.5mm），TAU組于傷后立即從尾靜脈給予?；撬嶂委?200m

2、g/kg)， sham組和TBI組給予等量的生理鹽水。用微透析探針收集各組傷后海馬CA1區(qū)（左側(cè)中線旁開2.00mm，前囟后4.20mm，皮質(zhì)下4.00mm）的1-3h、22-24h、7d的腦組織間液，用CMA600全自動生化分析儀檢測細(xì)胞間液的葡萄糖，乳酸，甘油，丙酮酸的含量以及乳酸/丙酮酸的比值。呼吸功能采用Clark氧電極檢測方法，提取各組24h和7d的左右腦組織線粒體，檢測線粒體的態(tài)Ⅲ呼吸(Respiratory StateⅢ，

3、R3)，態(tài)Ⅳ呼吸(respiratory stateⅣ，R4)，并計(jì)算了呼吸控制比(respiratory control rate，RCR)，磷氧比(P/O)。采用熒光法測定腦組織線粒體活性氧的生成。用熒光素一熒光素酶發(fā)光法測定線粒體ATP合成速率。
　　 結(jié)果:
　　 1、能量代謝:
　　 (1)在創(chuàng)傷后7d內(nèi)，三組在受傷海馬區(qū)的葡萄糖含量無顯著區(qū)別;創(chuàng)傷組的葡萄糖隨時(shí)間的推移而顯著升高。
　　 (2

4、)腦創(chuàng)傷組的乳酸含量在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)內(nèi)均顯著高于sham組，并隨時(shí)間推移而顯著下降;?；撬嵩?4h后顯著降低創(chuàng)傷后的乳酸含量，與假手術(shù)組比較無顯著區(qū)別。
　　 (3)與假手術(shù)組比較，腦創(chuàng)傷后受傷海馬區(qū)的甘油無顯著變化，而?；撬嵩?d時(shí)顯著降低其含量。
　　 (4)腦創(chuàng)傷組的乳酸/丙酮酸比值在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)內(nèi)均顯著高于假手術(shù)組，并隨時(shí)間而顯著下降;?；撬犸@著降低創(chuàng)傷后的乳酸/丙酮酸比值，但均顯著高于假手術(shù)組。
　　 2、呼

5、吸功能:
　　 (1)腦創(chuàng)傷后24h受傷側(cè)腦線粒體R3，R4，RCR，P/O均顯著低于sham組;?；撬犸@著升高腦創(chuàng)傷24h后的RCR和降低R4。右側(cè)腦組織各組之間無明顯差異。
　　 (2)腦創(chuàng)傷7d后R3，R4，P/O各指標(biāo)均恢復(fù)正常，RCR仍顯著低于sham組;?；撬嶂委熃M顯著提高腦創(chuàng)傷后的RCR，與假手術(shù)組比較，各指標(biāo)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。右側(cè)腦組織各組之間無明顯差異。
　　 (3)腦線粒體ROS生成:腦創(chuàng)傷后左

6、腦24h線粒體ROS生成增加，7d時(shí)下降，與sham組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;TAU組ROS隨時(shí)間推移顯著下降。創(chuàng)傷后右腦線粒體活性氧24h生成增加，7d顯著下降;TAU組ROS隨時(shí)間推移顯著降低。
　　 (4)腦線粒體ATP合成速率:腦創(chuàng)傷后24h左腦線粒體ATP合成速率降低，7d略有增加，與sham組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;TAU組ATP合成速率隨時(shí)間推移顯著增高。腦創(chuàng)傷24h和7d右腦線粒體ATP合成速率均低于sham組，與

7、sham組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;TAU組24h ATP合成速率低于sham組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，7d時(shí)基本恢復(fù)到正常水平。
　　 結(jié)論:
　　 1、腦創(chuàng)傷后腦組織間液中的乳酸、乳酸/丙酮酸比值顯著升高，牛磺酸對調(diào)節(jié)腦創(chuàng)傷后的代謝紊亂有一定的作用。
　　 2、腦創(chuàng)傷后傷側(cè)腦組織線粒體呼吸功能受損，但對右側(cè)腦組織線粒體的功能變化不明顯;?；撬崮芨纳颇X創(chuàng)傷后線粒體的呼吸功能狀態(tài)。
　　 3、腦創(chuàng)傷后傷側(cè)線粒體ROS