石油降解菌的分離、鑒定及降解特性的研究.pdf

1、石油在給人們帶來巨大經濟利益的同時，也對生態(tài)環(huán)境造成了巨大威脅。在勘察、開采、運輸以及儲存過程中，油田周圍大面積土壤都受到嚴重的污染。石油污染使得土壤理化性質發(fā)生改變，從而不利于農作物生長。石油中的多環(huán)芳烴類物質可通過呼吸、皮膚接觸、飲食攝入等方式進入人和動物體內，影響其肝、腎等器官的正常功能，甚至引起癌變。石油類物質還通過地下水的污染以及污染的轉移構成對人類生存環(huán)境多個層面上的不良脅迫。因此，治理石油污染有重要意義。 現有的石

2、油污染處理方式包括物理技術、化學技術和生物處理(生物修復)等。其中，生物修復具有明顯優(yōu)勢，生物修復中的微生物治理由于其費用低、效果好、無二次污染等優(yōu)點，倍受人們矚目。 本論文論述了石油降解菌的研究進展，測定了勝利油田石油污染土壤的一些理化性質，分析了各種理化因子對其中的微生物的影響。結果表明，勝利油田油污土壤的酸堿性、含水量等指標較有利于原油的降解。但氮、磷等營養(yǎng)物質含量不足，要想提高原油降解效率，必須投加一定比例的氮、磷等營養(yǎng)

3、物質。勝利油田石油污染的土壤中的細菌數量與土壤的污染程度呈正相關，這說明石油污染刺激了土壤細菌的生長繁殖。在這些增殖的細菌中有不少是石油降解菌。設法增加石油污染土壤中的石油降解菌的數量，在一定程度上可以提高原油的降解速率。 從油污土壤中篩選到48株石油降解菌，它們都能以石油作為唯一碳源生長。采用重量法對其降解能力進行了測定。其中，227＃菌株的除油能力較強，達到43％。對227＃菌株進行的生理生化和分子水平的鑒定表明該菌株是一株

4、銅綠假單胞菌。 從影響石油降解的因素入手，首先分析單因素對除油率的影響，然后采用正交試驗的方法對其除油條件進行優(yōu)化，優(yōu)化后的條件為pH7.5，初始原油濃度0.8％，裝液量為100ml/500ml，接種量為2.5％，35℃培養(yǎng)10天，在此條件下進行實驗，結果降解率為53.7％。對生物降解前后的原油組份進行了氣相色譜分析，可以發(fā)現進行生物處理后原油中的部分組分明顯降低或消失。 此菌株可以利用原油、機油、柴油、十六烷作為唯一碳

5、源。對與降解鏈烴相關的脫氫酶的酶活進行了測定，發(fā)現含油液體培養(yǎng)基中，各菌株的脫氫酶活性都比不含油液體培養(yǎng)基中的要高的多，說明石油降解菌的TTC-脫氫酶活性在培養(yǎng)液中有石油烴存在時顯著提高。因此，推斷該酶與菌株降解石油有一定的關系，并且該酶基因的高效表達需要有石油物質的誘導。 此菌株也可以利用萘、菲作為碳源進行生長。對與降解芳烴相關的鄰苯二酚2，3-雙加氧酶的酶活進行了測定。發(fā)現發(fā)酵液中的酶活遠低于細胞破碎后所測到的酶活。由此，可