2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:本研究采用質(zhì)粒載體介導(dǎo)的人類RUNT相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3(runt related transcription factor3)在體外通過(guò)脂質(zhì)體感染肺癌細(xì)胞株A549,并檢測(cè)基因?qū)Ψ伟┘?xì)胞的增殖、遷移、凋亡的作用。探索基因RUNX3對(duì)肺癌增殖、遷移、凋亡的影響,探究潛在的靶向治療肺癌新靶點(diǎn)。
  方法:(1)本次實(shí)驗(yàn)對(duì)四個(gè)分組的A549細(xì)胞株進(jìn)行研究,四個(gè)分組分別設(shè)置為實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組和空白組,實(shí)驗(yàn)組中加入過(guò)表達(dá)的R

2、unx3質(zhì)粒和脂質(zhì)體Lipofectamine(R)2000;陽(yáng)性對(duì)照組中加入空載質(zhì)粒和脂質(zhì)體Lipofectamine(R)2000;陰性對(duì)照組中加入脂質(zhì)體Lipofectamine(R)2000;空白組中只有1640培養(yǎng)基;(2)將過(guò)表達(dá)RUNX3(EGFP-RUNX3)和質(zhì)粒(EGFP-NC)擴(kuò)增提取;(3)通過(guò)脂質(zhì)體Lipofectamine(R)2000轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)RUNX3基因的質(zhì)粒載體(eGFP-RUNX3)并為實(shí)驗(yàn)組、Li

3、pofectamine(R)2000轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒(eGFP-NC)為設(shè)為陽(yáng)性對(duì)照組、單加Lipofectamine(R)2000為陰性對(duì)照組、單加無(wú)血清培養(yǎng)基1640為空白對(duì)照組進(jìn)行實(shí)驗(yàn);(4)使用QPCR檢測(cè)不同組別的RUNX3 mRNA表達(dá)量;(5)使用CCK-8試劑盒檢測(cè)不同組別的細(xì)胞增殖情況;(6)應(yīng)用Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同組別的細(xì)胞株遷移侵襲情況;(7)使用流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)不同組別的細(xì)胞凋亡情況。
  結(jié)果:(

4、1)本次研究成功提取到過(guò)表達(dá)Runx3基因質(zhì)粒和空載質(zhì)粒,并成功轉(zhuǎn)染到細(xì)胞株;(2)熒光定量PCR(QPCR)技術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組Runx3基因的mRNA表達(dá)量最高,顯著高于各個(gè)對(duì)照組(P<0.01);(3)CCK-8法分別測(cè)定(12h24h48h72h96h)各組的細(xì)胞增殖,結(jié)果表明各種細(xì)胞隨著時(shí)間的推移均呈現(xiàn)上升趨勢(shì),在增殖實(shí)驗(yàn)中轉(zhuǎn)染后72小時(shí)實(shí)驗(yàn)組過(guò)表達(dá)RUNX3OD值(0.883±0.15),陽(yáng)性對(duì)照組(1.638±0.17)

5、,陰性對(duì)照組(1.631±0.12),空白組(1.788±0.18),實(shí)驗(yàn)組明顯低于各個(gè)對(duì)照組(P<0.01);(4)侵襲實(shí)驗(yàn)中在200倍高倍鏡下隨機(jī)選取三個(gè)視野統(tǒng)計(jì)平均細(xì)胞數(shù)量,實(shí)驗(yàn)組,陽(yáng)性對(duì)照組,陰性對(duì)照組,空白組分別為(28±3.33),(100±2.66),(110±2.33),(180±3.66),實(shí)驗(yàn)組明顯低于各個(gè)對(duì)照組(P<0.01);(5)AnnexinV/PI雙染色法檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡及壞死比例,結(jié)果示實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組

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