早發(fā)冠心病患者高密度脂蛋白抗炎作用的機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討早發(fā)冠心病患者高密度脂蛋白（High Density Lipoprotein，HDL）與健康受試者HDL相比對(duì)氧化型低密度脂蛋白（Oxidized Low-Density Lipoprotein，ox-LDL）誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVECs）炎癥反應(yīng)影響的區(qū)別及可能的機(jī)制，進(jìn)一步明確早發(fā)冠心病的發(fā)病機(jī)制，為早發(fā)冠心病的臨床防治提供新思路。

2、>　　方法：⑴選取符合實(shí)驗(yàn)條件的健康受試者（男性＜55歲，女性＜65歲）及相應(yīng)年齡的早發(fā)冠心病患者（男性＜55歲，女性＜65歲），采集血樣，密度梯度離心法分離HDL；⑵ox-LDL處理HUVECs不同時(shí)間，通過(guò)Elisa法檢測(cè)細(xì)胞上清液中的炎癥因子如高遷移率族蛋白B1（High Mobility Group Protein Box1，HMGB-1）、腫瘤壞死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）、細(xì)胞間黏

3、附分子-1（Intercellular Cell Adhesion Molecule-1，ICAM-1）的表達(dá)情況，通過(guò)Western Blot檢測(cè)炎癥通路分子HMGB-1及晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（Receptor for Advanced Glycation End Product，RAGE）的表達(dá)情況，明確炎癥反應(yīng)最顯著的時(shí)間點(diǎn)；⑶不同濃度的HDL孵育HUVECs相應(yīng)時(shí)間后，檢測(cè)上述炎癥分子及炎癥通路分子的表達(dá)情況，明確HDL抗炎作

4、用最顯著的濃度；⑷比較早發(fā)冠心病患者HDL和健康受試者HDL抗炎作用是否具有差異。
　　結(jié)果：①50mg/L ox-LDL可以誘導(dǎo)HUVECs產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)細(xì)胞上清液中HMGB-1、TNF-α及ICAM-1的水平升高（P＜0.05），在48小時(shí)達(dá)到高峰；細(xì)胞HMGB-1、RAGE蛋白表達(dá)量升高，在24小時(shí)達(dá)到高峰，48小時(shí)表達(dá)量降低，但仍較正常細(xì)胞表達(dá)量高，RAGE表達(dá)量一直處于升高狀態(tài)，在48小時(shí)達(dá)到高峰（P＜0.

5、05）。②HDL對(duì)ox-LDL誘導(dǎo)的HUVECs的炎癥反應(yīng)具有抑制作用，細(xì)胞上清液中HMGB-1、TNF-α、ICAM-1的水平及細(xì)胞HMGB-1、RAGE蛋白表達(dá)量隨著HDL濃度的增加而降低（P＜0.05），當(dāng)HDL濃度達(dá)到200mg/L時(shí)上述炎癥分子的表達(dá)量最低，說(shuō)明此時(shí)HDL對(duì)炎癥反應(yīng)的抑制作用最顯著（P＜0.05）。③早發(fā)冠心病患者HDL組與健康受試者HDL組相比，細(xì)胞上清液中HMGB-1、TNF-α、ICAM-1的水平及細(xì)胞H