流感病毒與呼吸道合胞病毒雙重感染BALB-c小鼠的研究.pdf

1、呼吸道感染是臨床常見(jiàn)疾病，在眾多病原體中能導(dǎo)致呼吸道急性炎癥并具有較高致病率和致死率的兩個(gè)病毒是流感病毒(Influenza Virus, or Flu)和呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus，or RSV)。WHO對(duì)呼吸道感染致病的傳播監(jiān)測(cè)及病原體檢測(cè)的機(jī)構(gòu)在不同國(guó)家和地區(qū)新增了不少合作機(jī)構(gòu)，足見(jiàn)全球衛(wèi)生組織對(duì)呼吸道疾病的重視程度，在這個(gè)最具權(quán)威的國(guó)際組織影響和呼吁下，全球的科研衛(wèi)生機(jī)構(gòu)都對(duì)接觸到的病

2、例和臨床樣本進(jìn)行了詳細(xì)的檢查和統(tǒng)計(jì)分析。有研究表明，在呼吸道致病病原體中，其中所占比例最高的是病毒引起，在病毒性呼吸道疾病中，又以流感和呼吸道合胞病毒為主，如在臨床1個(gè)月至5歲的嬰幼兒，6歲至24歲的青少年，以及25歲至65歲人群感冒樣病例中，由病毒引起的病例約占45％，在共感染2種以上呼吸道病毒的人群中，RSV檢測(cè)陽(yáng)性的人群比例約為50％，其次是A型和B型流感病毒，分別為9.84％和10.39％，由于呼吸道病毒的傳播范圍廣，引起的急性

3、呼吸道炎癥比較嚴(yán)重，流感病毒和呼吸道合胞病毒的感染人群幾乎覆蓋了所有年齡階段，況且這兩種病毒都沒(méi)有可以大規(guī)模使用的有效疫苗，且在感染后對(duì)人類社會(huì)造成的危害和損失是不可估量的，在這樣的情況下，開(kāi)展對(duì)這兩個(gè)病毒的研究是必須和必然的。
　　為了研究雙重感染流感病毒和呼吸道合胞病毒在不同感染次序條件下，宿主免疫系統(tǒng)抗病毒免疫的相關(guān)機(jī)制，我們建立了雙重感染流感病毒(H1N1，A/PuertoRico/8/34)和呼吸道合胞病毒(Respir

4、atory Syncytial Virus，RSV-Long)的BALB/c小鼠模型來(lái)研究這兩種病毒在成功感染后對(duì)小鼠免疫系統(tǒng)的影響。利用流式細(xì)胞分析法，免疫組化和病理學(xué)方法，蛋白質(zhì)懸浮芯片法，結(jié)合對(duì)小鼠的日常觀察和解剖過(guò)程中的觀察來(lái)研究小鼠的免疫反應(yīng)，通過(guò)考察小鼠Th1，Th2，Th17和Treg細(xì)胞亞群的比例以及CD4，CD8細(xì)胞比例的變化情況，結(jié)合病毒載量和炎癥程度的結(jié)果來(lái)解釋說(shuō)明雙重感染后，小鼠免疫系統(tǒng)中CD4+T細(xì)胞的極化方向

5、，以及在改變病毒感染次序后又有何種變化。
　　結(jié)果顯示，1）病理學(xué)研究結(jié)果表明:雙重感染流感病毒和呼吸道合胞病毒的小鼠，其呼吸道組織損傷較單獨(dú)感染其中一種病毒的較嚴(yán)重，又以首次感染呼吸道合胞病毒再感染流感病毒的小鼠最嚴(yán)重;2）流式細(xì)胞分析結(jié)果表明:在雙重感染的不同階段，小鼠CD4+T細(xì)胞的比例在各亞群中分布不同，在雙重感染初期，首次感染流感病毒再感染呼吸道合胞病毒的小鼠以Th2類細(xì)胞免疫反應(yīng)為主，而當(dāng)改變感染次序后，則Th1和Th

6、2類免疫反應(yīng)水平相同，在感染中期，首次感染流感再感染呼吸道合胞病毒的小鼠其Th1和Th2類免疫反應(yīng)達(dá)到相同水平，而首次感染呼吸道合胞病毒再感染流感的小鼠開(kāi)始向Th2類免疫反應(yīng)轉(zhuǎn)換;在雙重感染的后期，兩種感染次序的小鼠都傾向于Th1類免疫反應(yīng)。雙重感染流感病毒和呼吸道合胞病毒能導(dǎo)致的炎癥和組織損傷比單獨(dú)感染更嚴(yán)重，且先感染呼吸道合胞病毒再感染流感病毒的最重。我們發(fā)現(xiàn)在感染發(fā)生的不同階段，Th17和Treg細(xì)胞能影響Th1和Th2的平衡。由