黑斑原（魚(yú)兆）同工酶的研究.pdf

1、黑斑原鮡Glyptosternon maculatum，是鰋鮡魚(yú)類(lèi)（Glyptosternoid catfishes）的一種，為冷水性高原魚(yú)類(lèi)，分布于我國(guó)西藏境內(nèi)的雅魯藏布江中游（謝通門(mén)至波密江段）及印度的布拉馬普特拉河（Brahmaputra）。關(guān)于黑斑原鮡的研究，多集中于分類(lèi)、生物地理學(xué)及鰋鮡魚(yú)類(lèi)系統(tǒng)演化、進(jìn)化等方面，目前為止，尚無(wú)黑斑原鮡群體或鰋鮡魚(yú)類(lèi)生化遺傳方面的研究報(bào)道。 本研究通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE），以

2、肌肉組織為材料，分析了2003年采集于雅魯藏布江謝通門(mén)江段、支流拉薩河和尼羊河黑斑原鮡群體的14種同工酶，根據(jù)遺傳相似度（I）和遺傳距離（D）檢驗(yàn)海拔高度不同的黑斑原鮡群體之間是否發(fā)生顯著遺傳分化現(xiàn)象，并進(jìn)行遺傳變異分析；另外，以心臟、肝臟、腦、眼、肌肉、脾臟和腎臟等組織為材料，對(duì)2005年采集于尼羊河黑斑原鮡樣本進(jìn)行同工酶組織特異性研究，并利用多態(tài)性高的組織進(jìn)行其群體遺傳變異情況。筆者依其生境狀況和黑斑原鮡自身遺傳變異情況提出了黑斑原

3、鮡種質(zhì)資源保護(hù)的措施。此外，本研究可為黑斑原鮡種質(zhì)資源的研究、應(yīng)用和保護(hù)提供可參考的生化遺傳資料和理論基礎(chǔ)。 研究的主要結(jié)果如下： 1．黑斑原鮡同工酶表達(dá)無(wú)性別差異； 2．黑斑原鮡不同地理群體生化遺傳差異不顯著； 3．腹腔外肝和腹腔內(nèi)肝同工酶表達(dá)無(wú)差異，即從同工酶方面證明腹腔外肝同腹腔內(nèi)肝生理功能一致； 4．黑斑原鮡同工酶表達(dá)具有組織特異性：ADH同工酶在肝臟中譜帶最多，活性最強(qiáng)，在肌肉

4、中譜帶最少，活性最弱；AO僅表現(xiàn)出肝型（Ao—A4）和肌型（Ao—B4），前者活性較強(qiáng)；EST同工酶在肝臟表達(dá)為活性較強(qiáng)的5條帶，腦和脾臟僅有1條帶，其余組織未見(jiàn)酶帶；GDH同工酶在肝臟中優(yōu)勢(shì)表達(dá)，在眼中活性最弱；Ldh—A4在肌肉中優(yōu)勢(shì)表達(dá)，—B4在肝臟、心臟和脾臟中優(yōu)勢(shì)表達(dá)，在肝臟、脾臟和腎臟組織中檢測(cè)到Ldh—C4同工酶；MDH和MEP同工酶均檢測(cè)到上清液型（s）和線粒體型（m），均在肝臟中優(yōu)勢(shì)表達(dá)；肌肉組織中未見(jiàn)GcDH和POD

5、酶帶；SDH同工酶在心臟、眼和肌肉組織中均僅有1條酶帶表達(dá)，其他組織表達(dá)為2條酶帶；SOD同工酶僅在優(yōu)勢(shì)表達(dá)的肝臟組織中檢測(cè)到s—SOD和m—SOD，其他組織只有m—SOD同工酶表達(dá)； 5．黑斑原鮡同工酶多態(tài)性較高，2次研究共定位檢測(cè)到10種酶的27個(gè)基因座位，其中，14個(gè)座位表現(xiàn)為多態(tài)，總多態(tài)座位比例為0．5185，多態(tài)座位比例因組織不同而異：肌肉>心臟>肝臟；群體平均雜合度觀測(cè)值（Ho）和期望值（He）也因組織而異：肝臟>

6、心臟>肌肉，變化范圍為分別為0．0201～0．0533、0．0310～0．0485，平均值分別為0．0370、0．0405，群體遺傳變異能力較弱； 6．經(jīng)X2檢驗(yàn)證明，黑斑原鮡種群符合Hardy—Weinberg基因平衡定律； 7．檢測(cè)到6個(gè)多態(tài)座位偏離Hardy—Weinberg平衡，由遺傳偏離指數(shù)d證明，Adh—A（在肝臟中表達(dá)時(shí)）和Ldh—B座位（在心臟和肝臟中表達(dá)時(shí)）存在雜合子過(guò)?，F(xiàn)象；Adh—B（在心臟和肌