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1、泛素化，特別是泛素結(jié)合酶Ubc13/Uev1介導(dǎo)的K63連接的多聚泛素化在促炎癥信號(hào)和先天免疫反應(yīng)中有著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。天然產(chǎn)物黃酮類(lèi)化合物，如斛皮素、木犀草素等，對(duì)一些疾病顯示出積極的調(diào)節(jié)作用，比如抗炎、抗腫瘤和抗氧化等。本項(xiàng)研究主要闡明了黃酮類(lèi)化合物抗炎作用的新型分子機(jī)制。我們首先確定了兩種典型黃酮類(lèi)化合物—斛皮素和木犀草素能夠有效地抑制IL-1β和LPS誘導(dǎo)的TAK1-IKK-NF-κB通路激活和下游靶基因的表達(dá)。我們進(jìn)一步分析并
2、發(fā)現(xiàn)了黃酮類(lèi)化合物顯著抑制了胞內(nèi)K63連接多聚泛素鏈的合成以及關(guān)鍵蛋白IRAK1和TRAF6的泛素化修飾。通過(guò)體外重建的泛素化反應(yīng)表明黃酮類(lèi)化合物特異地抑制Ubc13/Uev2介導(dǎo)的K63多聚泛素化，而非其它E2介導(dǎo)的泛素化。進(jìn)一步的機(jī)制研究表明黃酮類(lèi)化合物直接結(jié)合Ubc13/Uev2，并抑制泛素從Ub～Ubc13/Uev2中間體釋放及隨后的泛素鏈合成。我們測(cè)定了Ubc13/Uev2和木犀草素或桑色素之間的結(jié)合解離平衡常數(shù)(KD)，分別
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