2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、新型廣譜生物殺蟲(chóng)劑多殺菌素是由刺糖多孢菌經(jīng)有氧發(fā)酵產(chǎn)生的兩種最高活性次級(jí)代謝物spinosyn A和spinosyn D組成的混合物。多殺菌素殺蟲(chóng)譜廣,具有以下特性:作用方式獨(dú)特,對(duì)害蟲(chóng)活性高,半衰期短,低殘留,無(wú)抗藥性,對(duì)人畜無(wú)害,環(huán)境污染少等。多殺菌素在農(nóng)牧業(yè)具有廣闊的應(yīng)用前景,該產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)具有很好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。本文首先對(duì)多殺菌素HPLC檢測(cè)方法進(jìn)行優(yōu)化,然后進(jìn)行刺糖多孢菌高產(chǎn)菌株的理性化選育,獲得高產(chǎn)菌株后進(jìn)而對(duì)刺糖多孢菌

2、的搖瓶發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化,最后還進(jìn)行了多殺菌素的生理毒性試驗(yàn)。 首先對(duì)多殺菌素HPLC檢測(cè)方法進(jìn)行優(yōu)化,建立起多殺菌素的快速檢測(cè)方法。優(yōu)化后的HPLC檢測(cè)條件如下:色譜柱采用Agilent Zorbax XDB-C18柱;流動(dòng)相為66.7%甲醇+33.3%乙腈;流速1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)250 nm;柱溫25.0℃;進(jìn)樣量20μL。該條件下多殺菌素二組分spinosyn A和spinosyn D的保留時(shí)間分別為5.24 m

3、in和5.74 min,比優(yōu)化前HPLC條件下的保留時(shí)間分別縮短了55.3%和59.1%。HPLC檢測(cè)方法線(xiàn)性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)R=0.9999;同時(shí)該方法具有較高的精確度和準(zhǔn)確度,其變異系數(shù)為0.17%,平均回收率為100.21%。 根據(jù)多殺菌素的生物合成途徑和代謝調(diào)節(jié)機(jī)理,對(duì)刺糖多孢菌進(jìn)行理性化選育。本文采用UV結(jié)合LiCl以及DES結(jié)合LiCl兩種常規(guī)誘變方法對(duì)刺糖多孢菌進(jìn)行復(fù)合誘變,分別篩選鼠李糖抗性突變株、2-脫氧-

4、D-葡萄糖抗性突變株和多殺菌素抗性突變株,并結(jié)合自然分離純化,最終獲得高產(chǎn)菌株S-6032,其產(chǎn)量達(dá)到89.57 mg/L,較出發(fā)菌株(產(chǎn)量為38.03 mg/L,)提高了135.5%。 以S-6032為出發(fā)菌株,對(duì)刺糖多孢菌的搖瓶發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化。經(jīng)過(guò)一系列單因子實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn),最終確定最佳搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基為:葡萄糖50.0 g/L,麥芽糖10.0 g/L,棉籽蛋白20.0 g/L,硫酸銨1.0 g/L,硫酸鋅0.2 g/L,玉

5、米漿15.0 g/L,牛肉膏2.0 g/L,碳酸鈣5.0 g/L;確定搖瓶培養(yǎng)最佳接種量為10%,最佳裝液量為30 mL/250 mL搖瓶,最佳培養(yǎng)基初始pH為7.5。在最優(yōu)培養(yǎng)條件下對(duì)S-6032進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),最終產(chǎn)量為117.83 mg/L,較優(yōu)化前發(fā)酵培養(yǎng)條件下所得產(chǎn)量(89.57 mg/L)提高了31.6%。 最后進(jìn)行多殺菌素生理毒性試驗(yàn),結(jié)果表明多殺菌素對(duì)斜紋夜蛾幼蟲(chóng)毒殺效果顯著。發(fā)酵液提取多殺菌素樣品(約1 00

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