超臨界流體色譜分離純化白芷、木香等中藥有效成分的研究.pdf

1、超臨界流體色譜(Supercritical Fluid Chromatography, SFC)是20世紀(jì)80年代發(fā)展起來(lái)的一種色譜技術(shù)，是以超臨界流體(supercritical fluid, SCF)為流動(dòng)相的色譜分離分析方法。作為一種新型的色譜分離技術(shù)，SFC不僅高效、快速，而且分離過(guò)程中有機(jī)溶劑用量少，后處理簡(jiǎn)單，產(chǎn)品中有機(jī)溶劑殘留較少，符合綠色環(huán)保的新理念，因此受到國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者的青睞。近年來(lái)，在手性藥物拆分、中藥及天然產(chǎn)物的

2、分離純化等領(lǐng)域的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。
　　本文將SFC應(yīng)用于中藥有效成分的分離純化，采用SC-CO2為流動(dòng)相，并加入一定量的改性劑，分別對(duì)白芷、大黃、木香等五種中藥中的有效成分進(jìn)行了分離純化；所得各餾分的純度經(jīng)高效液相色譜(HPLC)測(cè)定均大于97％，化學(xué)結(jié)構(gòu)經(jīng)核磁共振波譜(NMR)及質(zhì)譜(MS)進(jìn)行鑒定。
　　1. SFC分離純化白芷中香豆素類成分的研究
　　實(shí)驗(yàn)探究了3種色譜柱(C18柱、氨基柱和二醇柱)、4種改性劑(

3、甲醇、乙醇、異丙醇和乙腈)、改性劑比例、流動(dòng)相流速、壓力及溫度對(duì)白芷中香豆素類成分分離效果的影響，確定了最優(yōu)的色譜分離條件。從50 mg白芷粗提物中最終純化得到3種香豆素類化合物(歐前胡素、氧化前胡素、異歐前胡素)的質(zhì)量分別為7.5 mg、10.2 mg、5.8 mg。另外，研究了色譜過(guò)程的熱力學(xué)規(guī)律，結(jié)果表明該實(shí)驗(yàn)條件下的SFC分離過(guò)程為焓控過(guò)程。
　　2. SFC分離純化大黃中有效成分的研究
　　建立了SFC分離純化大黃

4、中5種蒽醌類活性成分及苯乙烯酸的新方法。經(jīng)實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化，獲得了最優(yōu)的色譜分離條件，并從50 mg大黃粗提物中純化得到六種化合物(I、II、III、IV、V、VI)的質(zhì)量分別為4.9 mg、8.9 mg、7.8 mg、4.1 mg、4.8 mg、2.7 mg。
　　另外，對(duì)色譜過(guò)程的熱力學(xué)規(guī)律進(jìn)行了研究，結(jié)果表明該實(shí)驗(yàn)條件下的SFC分離過(guò)程為焓控過(guò)程。還結(jié)合物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)和出峰順序，對(duì)物質(zhì)在二醇基柱上的保留機(jī)制進(jìn)行了探討，分析得出

5、其保留行為既與化合物的極性大小有關(guān)，又和化合物與固定相之間形成的氫鍵作用強(qiáng)弱有關(guān)，是兩種因素綜合作用的結(jié)果。
　　3. SFC分離純化木香中有效成分的研究
　　將 SFC應(yīng)用于木香中活性成分的分離純化，經(jīng)實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化，確定了最優(yōu)的SFC分離條件，并從80 mg木香粗提物中最終純化得到2種倍半萜內(nèi)酯(木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯)的質(zhì)量分別為34.7 mg、25.3 mg。此外，還對(duì)色譜分離過(guò)程的熱力學(xué)規(guī)律進(jìn)行了研究，結(jié)果表明該

6、實(shí)驗(yàn)條件下的SFC分離過(guò)程為焓控過(guò)程；并結(jié)合物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)及出峰順序，與反相高效液相色譜(RP-HPLC)相比，分析得出在該實(shí)驗(yàn)條件下SFC分離過(guò)程為正相色譜過(guò)程。
　　4. SFC分離純化川芎中有效成分的研究
　　將 SFC應(yīng)用于川芎中內(nèi)酯類成分的分離純化，經(jīng)實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化，確定了最優(yōu)的SFC條件，并從60 mg川芎粗提物中分離純化出2種化合物(瑟丹酸內(nèi)酯、藁本內(nèi)酯)的質(zhì)量分別為11.2 mg、24.7 mg。此外，還對(duì)色

7、譜過(guò)程的熱力學(xué)規(guī)律進(jìn)行了研究，表明該實(shí)驗(yàn)條件下的SFC分離過(guò)程為焓控過(guò)程；并結(jié)合物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)及出峰順序，與RP-HPLC相比，分析得出在該實(shí)驗(yàn)條件下SFC分離過(guò)程為正相色譜過(guò)程。
　　5. SFC分離純化獨(dú)活中有效成分的研究
　　將 SFC應(yīng)用于獨(dú)活中香豆素類成分的分離純化，經(jīng)實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化，確定了最優(yōu)的色譜條件，并從50 mg獨(dú)活粗提物中分離純化出2種香豆素類成分(蛇床子素、異歐前胡素)的質(zhì)量分別為24.3 mg、4.2