細(xì)胞自噬調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞靜息機(jī)制的初步探討.pdf

1、血液細(xì)胞來(lái)源于骨髓中極少數(shù)長(zhǎng)期造血干細(xì)胞（又稱為多潛能造血干細(xì)胞）(long-term hematopoietic stem cells，LT-HSCs)。在骨髓中LT-HSC分化為短期造血干細(xì)胞(short-term HSCs， ST-HSCs)，ST-HSCs進(jìn)一步分化為不同的造血前體細(xì)胞，最終分化為成熟血細(xì)胞。作為血細(xì)胞的“種子”，大部分LT-HSCs分布在封閉的骨髓組織，處于不增殖，不分化，不凋亡的靜息狀態(tài)(quiescence

2、)，而干擾LT-HSCs的靜息狀態(tài)，會(huì)引起造血干細(xì)胞的異常擴(kuò)增，引起骨髓造血干細(xì)胞的衰竭(exhaustion)或者轉(zhuǎn)化為白血病干細(xì)胞，導(dǎo)致造血功能障礙。因此，維持LT-HSCs的靜息狀態(tài)，對(duì)維系骨髓的終生造血能力和應(yīng)激反應(yīng)能力有重要作用。
　　造血干細(xì)胞處于低氧的骨髓微環(huán)境(niche)。在低氧或者營(yíng)養(yǎng)缺乏的條件下，細(xì)胞自噬(autophagy)通過(guò)分解衰老的細(xì)胞器和變性的生物大分子為細(xì)胞的生存提供物質(zhì)和能量支持。細(xì)胞自噬是真核

3、生物中進(jìn)化保守的對(duì)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行周轉(zhuǎn)的重要過(guò)程。越來(lái)越多的研究表明，細(xì)胞自噬參與調(diào)節(jié)胚胎干細(xì)胞的增殖和分化、胚胎的生長(zhǎng)和發(fā)育。但是，因?yàn)槿狈τ行У膭?dòng)物和細(xì)胞模型，有關(guān)細(xì)胞自噬是否以及如何調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞靜息狀態(tài)的機(jī)制還不清楚。在前期研究的基礎(chǔ)上，本文以造血干細(xì)胞系EML為模型，利用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的技術(shù)方法，探討細(xì)胞自噬和造血干細(xì)胞狀態(tài)的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自噬參與調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞的靜息狀態(tài)的維持以及靜息和增殖狀態(tài)的轉(zhuǎn)換。
　

4、　本文的主要結(jié)果包括:
　　1.在EML細(xì)胞系，成功分離兩個(gè)細(xì)胞亞群(LSKCD34-(CD34-)和LSKCD34+(CD34+))。證實(shí)CD34-細(xì)胞處于靜息狀態(tài)，CD34+細(xì)胞處于增殖狀態(tài)，并且兩群細(xì)胞相互轉(zhuǎn)換。
　　2.基因表達(dá)譜分析發(fā)現(xiàn)， CD34-和CD34+兩群細(xì)胞中細(xì)胞自噬相關(guān)基因及其上游轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)存在顯著差異，自噬相關(guān)基因的表達(dá)在CD34-細(xì)胞顯著高于比CD34+細(xì)胞。
　　3.細(xì)胞自噬激活劑ra