紅景天與輪葉黨參聯(lián)合發(fā)酵提取物對小鼠免疫功能的影響.pdf

1、目的:當(dāng)今人們最關(guān)注的是健康，其目標(biāo)是充分發(fā)揮機體的一切生理功能，從而促進軀體上和精神上的健康。因此，尋找具有促進健康的生理活性且無毒副作用的天然活性物質(zhì)成為近年來的研究熱點。由于心血管疾病、癌癥、糖尿病等慢性非傳染性疾病的發(fā)生與體內(nèi)產(chǎn)生過多的自由基、機體免疫功能降低等因素關(guān)系十分密切。因此，當(dāng)前功能食品研究系帶尋找一些可清除自由基，并具有抗氧化和增強免疫功能的天然活性成分，以深入研究。紅景天為景天科(Crassulaceae)紅景天屬

2、(Rhodiola crenulata Hook. F. et Thoms)多年生草本植物。目前全球總共有90種，而我國占73種。其中，主要分布在我國長白山附近的是庫頁紅景天。由于紅景天具有廣泛的藥理學(xué)作用，包括抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)等功效，其需求量日趨增加，導(dǎo)致過度采伐，使其資源匱乏。紅景天中以紅景天苷和苷元—酪醇為主要功效成分，其中紅景天清除羥自由基的能力遠低于酪醇。本研究利用活性干酵母，將紅景天和輪葉黨參原料混合在一

3、起進行發(fā)酵，考察兩種原料混合發(fā)酵提取物對小鼠免疫功能的影響，為開發(fā)增強功能保健食品提供科學(xué)的理論依據(jù)。
　　方法:
　　1.體外血清藥理學(xué)實驗：大鼠分組：以10只大鼠為研究對象，隨機分為5組，2只/組。5個組別分別為對照組（Control）、未發(fā)酵紅景天組（NF-R）、未發(fā)酵輪葉黨參組（NF-C）、紅景天與輪葉黨參聯(lián)合發(fā)酵組（F-R+C）、紅景天與輪葉黨參生藥混合組（NF-R+C）。對照組予以生理鹽水灌胃，給藥組予以相應(yīng)組別

4、的藥物提取物進行灌胃，根據(jù)大鼠體重制定給藥劑量，給藥容積為10mL/kg BW，連續(xù)灌胃5天，第5天灌胃結(jié)束后1h予以無菌的眼球取血，離心，分離血清后，每組合并。56℃滅活30min。分別檢測藥物處理后T、B細胞的增殖情況，并測定NK細胞殺傷活性。
　　2.動物體內(nèi)實驗：將80只清潔級的Balb/c小鼠按體重隨機分為4組，每組各20只，對照組予以10mL/kg BW的蒸餾水灌胃，F(xiàn)-R+C組予以50mg/kg的混合發(fā)酵提取物灌胃，

5、NF-R+C組予以50mg/kg的混合生藥提取物灌胃，作為陽性對照組的PDT組（匹多莫德分散片溶液組）予以50mg/kg的匹多莫德分散片溶液灌胃，所有小鼠連續(xù)灌胃30天，每組20只，其中每組10只用于遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（delayed type hypersensitivity，DTH）實驗，以剩余的10只Balb/c小鼠為測定對象，測定NK細胞殺傷活性及脾淋巴細胞的增殖情況。分別計數(shù)脾細胞、胸腺細胞。采用ELISA法檢測脾細胞培養(yǎng)上清液中

6、5種細胞因子的含量，即白細胞介素-2、6、10（IL-2、6、10）、干擾素（IFN-γ）及腫瘤壞死因子（TNF-α）。
　　結(jié)果:
　　1.經(jīng)檢測大鼠的含藥血清結(jié)果可知：實驗結(jié)果表明：F-R+C組較Control顯著增加T淋巴細胞和B淋巴細胞的增殖能力，同時增強NK細胞的殺傷能力（P<0.01）。
　　2.檢測小鼠的重量及胸腺指數(shù)結(jié)果表明：PDT、紅景天和輪葉黨參聯(lián)合發(fā)酵提取物組（F-R+C）及未發(fā)酵組（NF-R+C

7、）的小鼠體重與空白對照組相比，四組的體重指標(biāo)無顯著差異，但是三組的胸腺指數(shù)均高于對照組的胸腺指數(shù)（P<0.01）。且兩藥聯(lián)合的發(fā)酵組其胸腺指數(shù)高于未發(fā)酵的兩藥聯(lián)合組，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。與空白對照組的脾臟指數(shù)相比，PDT組及兩藥聯(lián)合的發(fā)酵組的指數(shù)顯著升高，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；同時，兩藥聯(lián)合的發(fā)酵組其脾臟指數(shù)高于未發(fā)酵的兩藥聯(lián)合組，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　3.通過測定小鼠體內(nèi)脾

8、淋巴細胞的增殖及 NK細胞活性的能力實驗結(jié)果顯示：PDT組、紅景天與輪葉黨參聯(lián)合發(fā)酵組及未發(fā)酵組的T淋巴細胞及 B淋巴細胞的增殖能力及NK細胞活性均顯著提高，并優(yōu)于空白對照組（P<0.01），且兩藥聯(lián)合的發(fā)酵組顯著增強T、B淋巴細胞的增殖能力和NK細胞活性，并顯著高于未發(fā)酵組（P<0.05）。PDT組對NK細胞活性的影響雖高于未發(fā)酵組，但差異不顯著，無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　4.遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實驗結(jié)果表明：PDT組、兩藥

9、聯(lián)合的發(fā)酵組及未發(fā)酵組的小鼠耳腫脹明顯，高于空白對照組（P<0.01）。此外，發(fā)酵組的腫脹程度較未發(fā)酵組明顯，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。
　　5.通過測定5種細胞因子（IL-2、6、10、IFN-γ、TNF-α）在小鼠的脾細胞培養(yǎng)液中的含量結(jié)果表明：匹多莫德可顯著提升5種細胞因子的含量，明顯高于空白對照組，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。同時，5種細胞因子在兩藥聯(lián)合發(fā)酵組的含量顯著高于未發(fā)酵組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（