2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、【目的】利用RNA干擾技術(RNA interference,RNAi)抑制銅綠假單胞菌PBP-1b編碼基因mrcB的表達,探討PBP-1b對藻酸鹽編碼基因algD產(chǎn)生的影響,以期為臨床生物被膜耐藥提供新的思路。
　　【方法】采用siRNA表達載體的方法,分別設計2對靶向mrcB基因shRNA序列,構建pMF54mrcBshRNA干擾載體;將構建好的干擾載體及空載分別電轉入銅綠假單胞菌中,RT-PCR篩選抑制效率高的干擾載體,并分

2、別計算第24小時、第三天、第六天的抑制率;同時用RT-PCR的方法分別檢測PAO1標準株及轉化株中藻酸鹽編碼基因algD分別在這三個時間點內(nèi)的的表達情況,通過統(tǒng)計學處理觀察algD的表達量有無差異。
　　【結果】經(jīng)DNA測序鑒定,成功構建pMF54mrcBshRNA1/pMF54mrcBshRNA2干擾載體;將pMF54mrcBshRNA1/pMF54mrcBshRNA2/pMF54電轉入銅綠假單胞菌中,分別與空白組對照,RT-P

3、CR檢測第24小時mrcB表達量pMF54mrcBshRNA2有明顯統(tǒng)計學差異。計算其第24小時、第三天及第六天的抑制率分別為26％、41%、9%。單因素方差分析示標準株的algD基因在三個時間點表達的差異有統(tǒng)計學意義,第三天最高;轉化株的表達量,在這三個時間點都比較高,無統(tǒng)計學意義。在這三個時間點用T-檢驗分別比較標準株及轉化株algD基因的表達量,第三天無統(tǒng)計學意義,P>0.05。
　　【結論】PAO1標準株藻酸鹽編碼基因al

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