MicroRNA-378-5p通過靶基因BRAF抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖和誘導(dǎo)其凋亡.pdf

1、背景與目的：結(jié)直腸癌是人類第3位常見的惡性腫瘤，約占世界上所有癌癥病人總數(shù)的9.4％。據(jù)國際癌癥研究機(jī)構(gòu)報(bào)道，每年有近100萬人被發(fā)現(xiàn)患有結(jié)直腸癌。近年來，隨著人們對(duì)結(jié)直腸癌生物學(xué)機(jī)制越來越多的研究，發(fā)現(xiàn)了許多在其發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用的抑癌基因和癌基因。但是，人們對(duì)于結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制仍然知之甚少。microRNA(miRNA)是一類在基因翻譯中起重要作用的非編碼小RNA。人們發(fā)現(xiàn)miRNA-378-5p在許多人類惡性腫瘤包

2、括結(jié)直腸癌中表達(dá)失調(diào)。然而，miRNA-378-5p在結(jié)直腸癌中的致癌作用尚不清楚。本研究旨在探索miRNA-378-5p在結(jié)直腸癌發(fā)病中的作用。
　　方法：定量RT-PCR檢測(cè)miRNA-378-5p在結(jié)直腸癌腫瘤組織及其周圍正常組織和結(jié)腸癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況。通過CCK8法、細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miRNA-378-5p過表達(dá)后對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。通過熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證推測(cè)的miRNA-378-5p的靶基因

3、。通過qRT-PCR和Western blot檢測(cè)miRNA-378-5p對(duì)其靶基因的影響。
　　結(jié)果：miRNA-378-5p在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)量顯著低于正常組織，結(jié)腸癌細(xì)胞系中可發(fā)現(xiàn)同樣的結(jié)果。miRNA-378-5p過表達(dá)通過將結(jié)腸癌細(xì)胞阻滯在G0/G1期而抑制其增殖，同時(shí)還可以促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞的凋亡。BRAF是miRNA-378-5p的直接靶基因，miRNA-378-5p的過表達(dá)可以抑制BRAF mRNA和BRAF蛋白的