棉花黃萎病菌毒素誘導(dǎo)擬南芥幼苗差異表達(dá)基因的研究.pdf

1、本研究以模式植物擬南芥為材料，利用mRNA差異顯示技術(shù)分離出棉花黃萎病菌毒素(VD-toxin)誘導(dǎo)C型擬南芥幼苗差異表達(dá)基因(DD1-DD4)，并通過(guò)熒光定量PCR技術(shù)，著重研究了差異表達(dá)基因DD1和DD2在C型擬南芥(對(duì)Verticilliumdahliae敏感)和C24型擬南芥(對(duì)Verticilliumdahliae耐性)幼苗與VD-toxin互作反應(yīng)的早期的不同變化，以期揭示擬南芥抗VD-toxin作用的分子機(jī)制。 主

2、要結(jié)果如下：通過(guò)mRNA差異顯示方法分析了擬南芥幼苗在附含150μg/mLVD-toxin的MS培養(yǎng)基上誘導(dǎo)前后基因表達(dá)的差異。通過(guò)鑒定，從35條差異片斷中最終得到了4條陽(yáng)性片斷DD1、DD2、DD3、DD4。其中DD1、DD3、DD4在受到VD-toxin誘導(dǎo)后與對(duì)照相比表達(dá)增強(qiáng)，而DD2在受到VD-toxin誘導(dǎo)后表達(dá)下降。經(jīng)序列比對(duì)分析表明，DD1與擬南芥可能的組蛋白H2B基因AT3G09480具有99％的相似性，推測(cè)其在毒素處理

3、后的不同時(shí)期的表達(dá)變化，可能影響植物的細(xì)胞分裂活性和生長(zhǎng)，并在轉(zhuǎn)錄水平激發(fā)植物的防御反應(yīng)；此外，該基因產(chǎn)物可能在防御反應(yīng)中也具有類似在動(dòng)物中的抵抗毒素的作用；DD2全長(zhǎng)屬于pumilioMPT5基因家族，此家族的蛋白產(chǎn)物是多拷貝的翻譯的抑制物。在VD-toxin誘導(dǎo)的0-48h期間，DD2在C型與C24型擬南芥幼苗中的表達(dá)呈現(xiàn)完全不同的變化趨勢(shì)，推測(cè)DD2可能受到VD-toxin信號(hào)的調(diào)節(jié)，其產(chǎn)物對(duì)mRNA活性、定位及穩(wěn)定性具有不同的調(diào)

4、控作用，并對(duì)翻譯過(guò)程的負(fù)調(diào)控作用將最終影響細(xì)胞分裂；DD3是擬南芥線粒體基因組的一片斷，推測(cè)DD3的表達(dá)變化與活性氧和NO信號(hào)分子所參與調(diào)控的植物體內(nèi)的防御反應(yīng)有密切關(guān)系；DD4與擬南芥的BACT5I8的部分序列具有98％的相似性，基因分子量較大，目前功能又未知，因此進(jìn)一步研究較困難。以上各基因的全序列雖然已知，但有關(guān)其確切功能的研究尚未有報(bào)道，從本實(shí)驗(yàn)初步得到的結(jié)果分析，它們可能在擬南芥對(duì)VD-toxin的防御反應(yīng)中的不同方面于轉(zhuǎn)錄水