芍藥甘草湯對小鼠免疫功能影響的實驗研究.pdf

1、目的:以正常BAL B/c小鼠作為研究對象,芍藥甘草湯灌胃給藥后,在細胞水平和分子水平,利用流式細胞術(shù)、DTH免疫法、吞噬中性紅試驗、MTT法、ELISA法、3H-TdR摻入法等方法測定相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo),研究芍藥甘草湯對小鼠免疫功能的影響。
　　方法:1.用芍藥甘草湯給BAL B/c小鼠灌胃(0.4ml/只),每天一次,灌胃后第5天,小鼠背部皮下注射抗原卵清蛋白(OVA)100ug/只。2.灌胃后第14天,流式細胞儀檢測小鼠脾細胞中

2、CD3+、CD4+/CD8+T細胞。3.灌胃后第14天,吞噬中性紅試驗檢測活化巨噬細胞的功能。4.MTT法檢測小鼠NK細胞的活性。5.灌胃后第7天,小鼠背部皮下注射KLH100ul/只,初次免疫;注射后第7天,小鼠腳掌皮下注射KLH25ug/只,再次免疫,檢測DTH反應(yīng)的強度。6.注射OVA免疫后第14天,小鼠內(nèi)眥取血,ELISA法檢測小鼠血清內(nèi)OVA抗體含量。7.正常BALB/c小鼠制取脾細胞懸液,3H-TdR摻入法檢測芍藥甘草湯對小

3、鼠脾細胞增殖的影響。
　　結(jié)果:1. DTH免疫法結(jié)果顯示SGT組小鼠腳掌厚度差較PBS對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),且SGT組小鼠腳掌厚度差高于PBS對照組;2.吞噬中性紅試驗結(jié)果顯示SGT組較PBS陰性對照組OD540值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01),且SGT組OD540值高于PBS陰性對照組;3.MTT法結(jié)果顯示SGT組較PBS陰性對照組NK細胞殺傷率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01),且SGT組NK細胞殺傷率高于

4、PBS陰性對照組;4.ELISA法結(jié)果顯示SGT組較陰性對照組OD492值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),且SGT組OD492值高于陰性對照組;5.3H-TdR摻入法結(jié)果顯示:SGT1:8組、SGT1:16組、SGT1:32組較PBS陰性對照組cpm值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),且均高于陰性對照組;SGT1:4組較PBS陰性對照組cpm值差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。6.芍藥甘草湯對增加BALB/

5、c小鼠外周血CD3+、CD4+/CD8+T細胞亞群沒有明顯的作用(P＞0.05);
　　結(jié)論:1.芍藥甘草湯能增強CD4+T淋巴細胞活性;2.芍藥甘草湯能顯著增強小鼠腹腔巨噬細胞的活化;3.芍藥甘草湯能有效提高小鼠NK細胞的殺傷率;4.芍藥甘草湯對于B淋巴細胞分泌抗體的功能確有一定的促進作用;5.1:8、1:16、1:32濃度的芍藥甘草湯在體外能有效的刺激小鼠脾細胞的增殖,并呈濃度依賴性。6.芍藥甘草湯對增加BALB/c小鼠脾細胞