2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、蛋白質(zhì)組學(xué)是以系統(tǒng)和動(dòng)態(tài)的觀點(diǎn)研究蛋白質(zhì)及其相互作用的一門新興科學(xué)。它以樣品的分離和制備技術(shù)為基礎(chǔ),以生物質(zhì)譜技術(shù)為核心,以生物信息學(xué)為支撐,試圖實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)組高通量、全方位的定性、定量和定位研究。本論文涉及的研究工作主要集中在以下兩個(gè)方面:1)蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)的開發(fā),數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的制定,功能注釋體系的構(gòu)建;2)大規(guī)模蛋白質(zhì)磷酸化化學(xué)定量的方法學(xué)研究。本論文將對(duì)這兩部分工作進(jìn)行總結(jié)。 第一部分介紹差異表達(dá)蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)(DEPD)

2、的構(gòu)建和使用。比較蛋白質(zhì)組學(xué)的目標(biāo)是系統(tǒng)比較兩種細(xì)胞狀態(tài)(如疾病和正常狀態(tài))之間的蛋白質(zhì)表達(dá)譜差異,關(guān)注由疾病或者是環(huán)境因子作用引起的蛋白質(zhì)量的變化。隨著定量蛋白質(zhì)組學(xué)的發(fā)展,大量蛋白質(zhì)差異表達(dá)數(shù)據(jù)被發(fā)表在各類非格式化文獻(xiàn)中。盡管這些數(shù)據(jù)對(duì)于尋找生物標(biāo)記物和藥物靶點(diǎn)很有價(jià)值,但不幸的是很少有人把它們整合成格式統(tǒng)一的數(shù)據(jù)資源。目前國(guó)內(nèi)外還沒有關(guān)于差異表達(dá)蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)庫(kù)。這種現(xiàn)狀阻礙了科學(xué)家從比較蛋白質(zhì)組學(xué)的研究成果中獲得可靠而有價(jià)值的信息

3、。為此開發(fā)了DEPD數(shù)據(jù)庫(kù)來儲(chǔ)存這些信息。人工提取了來自104篇文獻(xiàn)的3266個(gè)差異表達(dá)蛋白質(zhì)信息。所有這些蛋白質(zhì)差異表達(dá)信息都附有詳細(xì)的樣本、外界環(huán)境以及試驗(yàn)方法學(xué)描述,以確保這些差異表達(dá)數(shù)據(jù)能被正確解讀。為了統(tǒng)一“比較蛋白質(zhì)組學(xué)”產(chǎn)出數(shù)據(jù)的格式,我們提出了比較蛋白質(zhì)組學(xué)模型(CPXS 0.1)。它定義了描述一個(gè)比較蛋白質(zhì)組學(xué)試驗(yàn)所需的最小信息需求,是DEPD的數(shù)據(jù)模型。為了方便數(shù)據(jù)查詢和提交,設(shè)計(jì)了一個(gè)界面友好的數(shù)據(jù)庫(kù)網(wǎng)站,提供了一

4、系列較為完備的蛋白質(zhì)功能分析工具。 第二部分主要介紹大規(guī)模蛋白質(zhì)組磷酸化化學(xué)定量檢測(cè)的方法學(xué)研究。蛋白質(zhì)組磷酸化研究一直以來都是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。以往的蛋白質(zhì)組磷酸化研究一般集中于:1)磷酸化蛋白,肽段以及磷酸化位點(diǎn)的鑒定;2)磷酸激酶、磷酸酯酶與其底物之間的相互作用;3)磷酸化肽段(蛋白)的定量和動(dòng)態(tài)變化的研究。而測(cè)量細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)磷酸化的化學(xué)定量(即磷酸化比例)卻是一個(gè)被人忽視而又非常重要的科學(xué)問題。以往發(fā)表的少數(shù)關(guān)

5、于磷酸化化學(xué)定量的研究都局限在細(xì)胞外或者少數(shù)幾種磷酸化蛋白上。因此開發(fā)一種可靠的大規(guī)模確定細(xì)胞內(nèi)磷酸化化學(xué)定量的方法是蛋白質(zhì)組磷酸化研究走向深入的重要一環(huán)。以Hela細(xì)胞的細(xì)胞核和胞漿為材料,采用密度梯度離心、SDS-PAGE等方法初步富集目的蛋白,酶解后用16O水和18O水分別標(biāo)記完全去除磷酸化和未經(jīng)處理的兩個(gè)相同細(xì)胞組分。運(yùn)用Bruker UltraFlex TOF/TOF MS質(zhì)譜儀,通過比較兩者之間各肽段豐度的差異找到磷酸化肽段

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