環(huán)氧化酶抑制劑對切口痛大鼠痛行為及中樞β-內(nèi)啡肽水平的影響.pdf

1、目的：
　　通過環(huán)氧化酶(cyclooxygenase, COX)抑制劑——氟比洛芬酯(flurbiprofen axetil，F(xiàn)A)預先給藥對切口痛大鼠鎮(zhèn)痛效果的比較，觀察其對外周血、脊髓和下丘腦弓狀核（Hypothalamic arcuate nucleus, ARC）β-內(nèi)啡肽表達的影響，探討FA鎮(zhèn)痛的中樞機制。
　　方法：
　　選取基礎機械刺激縮足域（paw withdrawal mechanical thre

2、shold,PMWT）正常的雄性SD大鼠90只，體重180-230g，采用隨機數(shù)字表法將其分為5組（n=18）：假手術組（S組）、模型組（C組）和低劑量（3mg/kg）FA組（low FA, LF組）、中劑量（6mg/kg）FA組（medium FA, MF組）、高劑量（12mg/kg）FA組（high FA, HF組）。S組尾靜脈注射脂肪乳1ml后30min，吸入1%七氟醚5min，不造模；C組尾靜脈注射脂肪乳1ml后30min，吸入

3、1%七氟醚麻醉下行足底切口痛模型；LF，MF，HF組尾靜脈分別注射3mg/kg，6mg/kg，12mg/kg FA1ml后30min，吸入1%七氟醚麻醉下行足底切口痛模型。
　　分別在術后1h（T1），6h（T2），12h（T3）用von Frey電子測痛儀測量PMWT后，用3%戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注射，深麻醉大鼠，取大鼠左心室血3ml用酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay,

4、 ELISA）法測量血清炎性因子：腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor, TNF）-α，白細胞介素（Interleukin, IL）-1β，IL-6和 IL-10及β-內(nèi)啡肽水平，取大鼠脊髓腰膨大和ARC，用ELISA法測量其β-內(nèi)啡肽水平，并在光鏡下觀察組織切片免疫組織化學染色結(jié)果。
　　用定量聚合酶鏈式反應（RT-qPCR）法測量脊髓腰膨大和ARC內(nèi)β-內(nèi)啡肽前體——前阿黑皮素原（pre-proopiome

5、lanocortin, POMC）mRNA相對表達量。
　　結(jié)果：
　?。?）PMWT：各組間基礎值差異無意義（P＞0.05），與S組比較，C組在各時間點明顯降低；與C組相比，LF，MF及HF組在各時間點則升高，且隨著劑量升高而升高（P＜0.05）。
　　（2）血清炎癥因子及β-內(nèi)啡肽水平：與S組比較，C組IL-10水平在各時間點差異無意義（P＞0.05），TNF-α, IL-1β, IL-6水平升高（P＜0.01），

6、T1時點β-內(nèi)啡肽水平增高，T2，T3時降低（P＜0.01）；與C組比較，LF，MF及HF組IL-10水平在各時間點升高，且隨著劑量升高而升高，而TNF-α, IL-1β, IL-6水平降低，且隨著劑量升高而降低（P＜0.05），T1時點LF，MF及HF組β-內(nèi)啡肽水平降低（P＜0.05），T2時點LF組變化無意義（P＞0.05），MF及HF組則升高（P＜0.05），T3時點LF，MF及HF組增高（P＜0.01），三組間在各時間點β-內(nèi)

7、啡肽水平隨著劑量升高而升高（P＜0.05）。
　?。?）脊髓和ARC內(nèi)β-內(nèi)啡肽水平：與S組相比，C組脊髓β-內(nèi)啡肽水平在T1時點無變化（P＞0.05），而在T2，T3時降低（P＜0.01）；ARC內(nèi)β-內(nèi)啡肽水平在T1時點升高（P＜0.01）在T2，T3時變化無意義（P＞0.05）；與C組相比，在各時間點，LF，MF及 HF組脊髓和 ARC內(nèi)β-內(nèi)啡肽水平增高且隨著劑量升高而升高（P＜0.05）。
　?。?）脊髓和ARC內(nèi)