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1、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是人類的一種機會致病菌,在患者免疫力低下時,常??梢砸鸺甭愿腥荆瑥亩鴮θ祟惿斐赏{。群體感應(yīng)(Quorum sensing,QS)系統(tǒng)控制著銅綠假單胞菌中大量毒力因子的表達,從而構(gòu)成一個非常復雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),但是其中詳細的調(diào)控機制還沒有被完全的闡明。另外,參與蛋白降解過程的ATP依賴型蛋白酶ClpAP被認為與銅綠假單胞菌中一系列代謝途徑有關(guān),但是該蛋白酶在代謝過程中的作用
2、基質(zhì)和分子機制卻不是完全清楚。
在早前的研究中,發(fā)現(xiàn)群體感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)子VqsM可以直接結(jié)合在PA2588基因的啟動子區(qū)域??紤]到lasI和PA2588的表達都受到VqsM的直接調(diào)控,設(shè)想PA2588蛋白是否也可以調(diào)控與銅綠假單胞菌群體感應(yīng)系統(tǒng)有關(guān)的毒力因子。利用基因敲除的方法構(gòu)建了PA2588的基因敲除突變體,并發(fā)現(xiàn)該基因的缺失,會增加綠膿菌素的產(chǎn)量和生物膜的形成。為了對PA2588蛋白的功能有更加深入的了解,通過ChIP-s
3、eq分析實驗,發(fā)現(xiàn)PA2588蛋白直接結(jié)合在pqsH基因的啟動子區(qū)域,此區(qū)域編碼了銅綠假單胞菌群體感應(yīng)系統(tǒng)喹諾酮信號的主要合成酶PqsH。還發(fā)現(xiàn)PA2588蛋白的C-末端結(jié)構(gòu)域與其他AraC蛋白家族成員的DNA結(jié)合區(qū)域相類似,通過對其結(jié)構(gòu)的進一步研究發(fā)現(xiàn)PA2588蛋白在N-末端區(qū)域有一個新穎的褶皺,同時它的C-末端的HTH區(qū)域也是一個特殊的DNA識別區(qū)域。另外,還證明了銜接蛋白ClpS會在PA2588蛋白被遞送到ATP依賴型蛋白酶Cl
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