黃芩素聯(lián)合吉西他濱誘導(dǎo)人胰腺癌細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、胰腺癌是惡性程度高、死亡率高的消化系統(tǒng)腫瘤，由于胰腺癌的診斷困難，發(fā)病早期癥狀不明顯，目前對(duì)胰腺癌的治療仍不理想，生存率不足5％。目前吉西他濱是胰腺癌輔助化療的一線藥物，但對(duì)胰腺癌患者生存率的提高仍然不足。近年來(lái)，多個(gè)臨床試驗(yàn)將吉西他濱和其他藥物聯(lián)合治療胰腺癌，但是效果仍不理想。因此，尋找更有效的治療胰腺癌的藥物，或者能聯(lián)合吉西他濱達(dá)到更好治療效果的藥物十分重要。中藥黃芩的主要有效成分是黃芩素，黃芩素也是黃芩主要發(fā)揮藥理作用的成分。研究

2、發(fā)現(xiàn)，黃芩素具有多種藥理學(xué)作用，特別對(duì)多種腫瘤具有顯著的抑制效果。小劑量短時(shí)間經(jīng)過(guò)黃芩素的處理，腫瘤細(xì)胞能得到有效抑制，而當(dāng)大劑量長(zhǎng)時(shí)間黃芩素處理后，能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。因此，我們考慮通過(guò)小劑量的黃芩素聯(lián)合吉西他濱是否能有效的抑制胰腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，成為潛在的治療手段。
　　研究方法
　　(1)體外研究黃芩素聯(lián)合吉西他濱對(duì)胰腺癌細(xì)胞的抑制作用及機(jī)制
　　1、MTT檢測(cè)黃芩素、吉西他濱和兩種藥物聯(lián)用對(duì)胰腺癌細(xì)胞系CFPAC

3、-1增殖的抑制作用;
　　2、Hoechst33258染色，熒光顯微鏡下觀察黃芩素及黃芩素聯(lián)合吉西他濱對(duì)胰腺癌細(xì)胞的影響;
　　3、Annexin-V APC/7-AAD雙染法檢測(cè)黃芩素、吉西他濱和兩種藥物聯(lián)用對(duì)胰腺癌細(xì)胞凋亡的影響;
　　4、黃芩素、吉西他濱和兩種藥物聯(lián)用在胰腺癌細(xì)胞中對(duì)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響;
　　(2)藥物治療胰腺癌裸鼠移植模型
　　將人胰腺癌細(xì)胞系CFPAC-1注射到裸鼠背部建立裸鼠

4、移植瘤模型，待皮下腫瘤生長(zhǎng)到2-4 mm開(kāi)始給藥，分別給予黃芩素、吉西他濱和兩種藥物聯(lián)用，記錄裸鼠體重及皮下移植瘤體積，共觀察28天。然后處死裸鼠，取腫瘤進(jìn)行稱重和免疫組化染色。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　1、黃芩素或吉西他濱均能顯著抑制人胰腺癌細(xì)胞系CFPAC-1細(xì)胞增殖，并且具有藥物濃度依耐性，并且兩種藥物聯(lián)用對(duì)細(xì)胞增殖抑制效果更為顯著;
　　2、黃芩素與吉西他濱聯(lián)用能誘導(dǎo)人胰腺癌細(xì)胞系CFPAC-1細(xì)胞凋亡;