番茄灰霉病菌對(duì)咯菌腈和氟啶胺的抗性風(fēng)險(xiǎn)研究.pdf

1、番茄灰霉病是一種世界性病害,對(duì)番茄造成嚴(yán)重危害。目前生產(chǎn)上以化學(xué)防治為主,但灰霉病菌對(duì)多菌靈、腐霉利、乙霉威、嘧霉胺等常用殺菌劑已產(chǎn)生抗性,使其防效大為降低,給番茄生產(chǎn)帶來(lái)重大損失。據(jù)報(bào)道由瑞士先正達(dá)公司研發(fā)的苯基吡咯類殺菌劑咯菌腈和由日本石原公司研發(fā)的吡啶胺類殺菌劑氟啶胺對(duì)番茄灰霉病有較好防效,在國(guó)內(nèi)尚未普遍使用。為研究番茄灰霉病菌對(duì)咯菌腈和氟啶胺的抗性風(fēng)險(xiǎn),本研究進(jìn)行了咯菌腈和氟啶胺對(duì)番茄灰霉病菌的生物活性、番茄灰霉病菌對(duì)咯菌腈和氟

2、啶胺的敏感性及對(duì)不同殺菌劑的交互抗性關(guān)系、室內(nèi)獲得抗性菌株的潛力和抗性突變體的生物學(xué)性狀、抗藥性機(jī)理、田間連續(xù)施藥對(duì)番茄灰霉病菌對(duì)咯菌腈敏感性變異的影響等方面的研究。主要結(jié)果如下:
　　 1.采用離體葉片法測(cè)定了咯菌腈和氟啶胺對(duì)番茄灰霉病的預(yù)防和治療作用,咯菌腈濃度為2μg/mL時(shí)保護(hù)性防效為87.55％,20μg/mL時(shí)治療性防效為96.23%。氟啶胺濃度為2μg/mL時(shí)保護(hù)性防效為82.10%,200μg/mL時(shí)治療性防效為

3、96.06%?？┚婕嬗斜Ｗo(hù)和治療效果,而氟啶胺主要表現(xiàn)為保護(hù)作用。
　　 2.測(cè)定了河北和山東不同地區(qū)的106株番茄灰霉病菌對(duì)咯菌腈和氟啶胺的敏感性。其對(duì)咯菌腈的EC50值在0.0039～0.0449μg/mL之間,均表現(xiàn)對(duì)咯菌腈高度敏感。其對(duì)氟啶胺的EC50值分布在0.0016～0.0531μg/mL之間,不同區(qū)域間的EC50值存在較大差異。通過(guò)對(duì)不同藥劑EC50值之間的線性回歸分析,發(fā)現(xiàn)對(duì)咯菌腈、氟啶胺、啶菌嗯唑、啶酰菌胺

4、和嘧霉胺無(wú)交互抗性關(guān)系。
　　 3.2個(gè)親本敏感菌株經(jīng)紫外誘導(dǎo),獲得6個(gè)抗咯菌腈突變體,其抗性水平在319～10000倍之間,抗性突變頻率為3.13×10-7。30個(gè)敏感菌株經(jīng)藥劑馴化獲得2個(gè)抗咯菌腈突變體,抗性水平分別為46倍及大于150000倍,抗性頻率為0.3175%。然而,在同等條件下均未獲得抗氟啶胺的突變體。8個(gè)抗性突變體中,7株抗藥性可穩(wěn)定遺傳,有1株在PDA平板上繼代培養(yǎng)11代后抗性消失。抗性突變體的菌絲生長(zhǎng)速率、

5、產(chǎn)孢量、產(chǎn)菌核數(shù)及致病力均低于其親本菌株。
　　 4.試驗(yàn)結(jié)果顯示,所有突變體在高濃度NaCl培養(yǎng)基上表現(xiàn)極為敏感。紫外誘導(dǎo)獲得的6個(gè)抗性突變體在高濃度的葡萄糖培養(yǎng)基上表現(xiàn)敏感,而藥劑馴化獲得的2個(gè)抗性突變體對(duì)高糖滲透壓不敏感。
　　 5.初步探討了番茄灰霉病菌對(duì)咯菌腈的抗性分子機(jī)理。經(jīng)PCR擴(kuò)增后,咯菌腈抗感菌株的組氨酸激酶基因片段堿基大小在918～981bp之間。測(cè)序結(jié)果顯示,只有突變體Rla-j與親本敏感菌株的組氨