抵擋湯對(duì)STZ誘導(dǎo)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：糖尿病性視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy，DR)是最嚴(yán)重和常見的糖尿病并發(fā)癥之一。糖尿病因糖代謝障礙致全身各組織器官的微血管異常，在眼部可引起視網(wǎng)膜缺血缺氧，新生血管形成，纖維增殖等，以致視網(wǎng)膜脫離，甚至導(dǎo)致視力喪失。糖尿病性視網(wǎng)膜病變的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，至今尚未完全闡明。中醫(yī)則根據(jù)糖尿病性視網(wǎng)膜病變所引起視功能障礙的程度不同而有不同的稱謂，如“暴盲”、“消渴目病”、“視瞻昏渺”等。因本病具有外眼正常，從內(nèi)而蔽

2、之的特點(diǎn)，故歸屬于中醫(yī)學(xué)的“內(nèi)障”眼病范疇。抵擋湯出自東漢張仲景《傷寒雜病論》，由水蛭、桃仁、虻蟲、大黃4味藥組成，是治療蓄血實(shí)證的經(jīng)典破血逐瘀名方，具有活血通絡(luò)、逐瘀攻下之功效。本實(shí)驗(yàn)以抵擋湯為主線，通過形態(tài)學(xué)和基因表達(dá)兩條途徑，分析抵擋湯對(duì)STZ誘導(dǎo)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變的可能作用機(jī)制，以求尋找中醫(yī)藥防治糖尿病性視網(wǎng)膜病變的新思路。
　　 目的：通過STZ誘導(dǎo)建立糖尿病大鼠模型，探討不同時(shí)間段給予抵擋湯干預(yù)對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病

3、變相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)、形態(tài)學(xué)及基因表達(dá)的影響及其作用機(jī)制。
　　 方法：利用鏈脲佐菌素(STZ)尾靜脈注射，配合高脂飼料飲食制備糖尿病大鼠模型，將大鼠分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、抵擋湯晚期組、抵擋湯中期組、抵擋湯早期組、辛伐他汀組、羅格列酮組。觀察抵擋湯對(duì)糖尿病大鼠生長(zhǎng)狀態(tài)、體重、血糖、血胰島素的影響，HE染色后觀察視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)改變，免疫組化染色觀察ICAM-1和VCAM-1蛋白的表達(dá)，RT-PCR方法檢測(cè)視網(wǎng)膜VEGF、TGF-β

4、1和PKC-β2mRNA的表達(dá)，探討抵擋湯影響糖尿病性視網(wǎng)膜病變的可能作用機(jī)制。
　　 結(jié)果：成功建立了STZ誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型。到實(shí)驗(yàn)12周時(shí)，與正常對(duì)照組比較，其他各組大鼠體重明顯升高，說明高脂飼料飲食可明顯增加大鼠體重，而有助于糖尿病大鼠模型的建立。與正常對(duì)照組比較，STZ誘導(dǎo)糖尿病造模各組大鼠血糖明顯升高；與模型對(duì)照組比較，羅格列酮組大鼠血糖明顯降低，而抵擋湯干預(yù)各組及辛伐他汀組大鼠血糖則無明顯變化。與正常對(duì)照組比較，光

5、鏡下HE染色可見模型對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)不規(guī)則，水腫，細(xì)胞排列紊亂，有部分細(xì)胞突出于內(nèi)界膜；與模型對(duì)照組比較，抵擋湯早期組大鼠視網(wǎng)膜病變相對(duì)輕微。與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜ICAM-1和VCAM-1表達(dá)增多，表明糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織有明顯病理改變；而與模型對(duì)照組比較，抵擋湯早期組、抵擋湯中期組、辛伐他汀組和羅格列酮組的大鼠視網(wǎng)膜免疫組化染色I(xiàn)CAM-1和VCAM-1表達(dá)減少，病理改變相對(duì)較輕。RT-PCR檢測(cè)顯示，正常對(duì)照組

6、大鼠視網(wǎng)膜組織內(nèi)VEGF、TGF-β1和PKC-β2的mRNA均有少量表達(dá)；與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜組織內(nèi)VEGF、TGF-β1和PKC-β2的mRNA表達(dá)均有一定程度的升高；而與模型對(duì)照組比較，抵擋湯早期組、抵擋湯中期組、辛伐他汀組和羅格列酮組的大鼠視網(wǎng)膜組織內(nèi)VEGF、TGF-β1和PKC-β2的mRNA表達(dá)均明顯降低，其中以抵擋湯早期組大鼠視網(wǎng)膜組織內(nèi)VEGF、TGF-β1和PKC-β2的mRNA表達(dá)減弱更為明顯。<

7、br>　　 結(jié)論：本研究在建立STZ誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型基礎(chǔ)上，觀察糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變，發(fā)現(xiàn)抵擋湯一定時(shí)間段給藥干預(yù)具有影響糖尿病性視網(wǎng)膜病變發(fā)生和發(fā)展的作用，尤其在抵擋湯早期干預(yù)后，糖尿病大鼠視網(wǎng)膜受到明顯的保護(hù)，其病變發(fā)展得到延緩，這可能與抵擋湯降低ICAM-1和VCAM-1蛋白在視網(wǎng)膜組織表達(dá)，降低VEGF、TGF-β1和PKC-β2的mRNA在視網(wǎng)膜組織表達(dá)，從而抑制糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變的炎癥反應(yīng)等機(jī)制有密切聯(lián)系。