分子標(biāo)記技術(shù)在澤瀉上的應(yīng)用.pdf

1、為了有效地區(qū)別各產(chǎn)地澤瀉品種,為澤瀉類道地藥材的栽培、繁育和質(zhì)量評(píng)價(jià)提供分子水平的依據(jù),該文對(duì)采自三個(gè)產(chǎn)地(福建、江西、四川)的澤瀉進(jìn)行分子標(biāo)記,包括RAPD、18S-26S rRNA-RFLP、18S-26S rRNA基因及其ITS片斷的擴(kuò)增、克隆及測(cè)序.①對(duì)RAPD的各項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行了一系列的比較和探索,包括模板DNA的提取方法、Taq酶的用量、dNTP的濃度等條件的優(yōu)化,建立了優(yōu)化反應(yīng)體系.并篩選了73個(gè)隨機(jī)引物,結(jié)果表明福建與江西產(chǎn)

2、的澤瀉為同一類,與四川產(chǎn)的澤瀉有所區(qū)別.②由于不能區(qū)分福建的兩個(gè)澤瀉品種(高葉澤瀉、矮葉澤瀉),故欲通過(guò)對(duì)澤瀉的18S-26SrRNA基因及其ITS片斷進(jìn)行擴(kuò)增,然后用RFLP技術(shù)進(jìn)一步分析,篩選了13種限制性內(nèi)切酶,結(jié)果發(fā)現(xiàn)內(nèi)切酶Alu I可以較好地區(qū)分出福建、江西與四川產(chǎn)地澤瀉的區(qū)別,與RAPD結(jié)果一致,但仍未能區(qū)分出福建高葉澤瀉與矮葉澤瀉.③對(duì)澤瀉18S-26S rRNA基因及其ITS擴(kuò)增片斷在大腸桿菌里進(jìn)行克隆,并對(duì)其擴(kuò)增片段進(jìn)