大鼠性成熟前期睪丸扭轉(zhuǎn)對(duì)性成熟期健側(cè)睪丸c-kit、PI3K表達(dá)的影響.pdf

1、目的：了解大鼠性成熟前期一側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)后，對(duì)處于不同狀態(tài)的扭轉(zhuǎn)睪丸（扭轉(zhuǎn)未壞死睪丸、扭轉(zhuǎn)疑似壞死睪丸、扭轉(zhuǎn)壞死睪丸），特別是扭轉(zhuǎn)疑似壞死睪丸、扭轉(zhuǎn)壞死睪丸，采取何種手術(shù)方式（復(fù)位/切除），可最大限度降低性成熟期對(duì)側(cè)睪丸生精功能的損害。
　　方法：
　　(1)實(shí)驗(yàn)方法：采用國(guó)際通用的Turner法制作性成熟前期的睪丸扭轉(zhuǎn)模型：56只3周齡雄性SD大鼠，隨機(jī)分成7組，每組8只，任選一組行假手術(shù)，作為對(duì)照組(Control grou

2、p，CG)。扭轉(zhuǎn)未壞死睪丸復(fù)位組(Non-necrotic testis detorsion group，NNTD)：左側(cè)睪丸逆時(shí)針扭轉(zhuǎn)90°固定4h后復(fù)位睪丸；扭轉(zhuǎn)未壞死睪丸切除組(Non-necrotic testis orchiectomy group，NNTO)：左側(cè)睪丸逆時(shí)針扭轉(zhuǎn)90°固定4h后切除睪丸。扭轉(zhuǎn)疑似壞死睪丸復(fù)位組(Suspected necrotic testis detorsion group,SNTD)：左側(cè)

3、睪丸逆時(shí)針扭轉(zhuǎn)360°固定4h后復(fù)位睪丸；扭轉(zhuǎn)疑似壞死睪丸切除組(Suspected necrotic testis orchiectomy group,SNTO)：左側(cè)睪丸逆時(shí)針扭轉(zhuǎn)360°固定4h后切除睪丸。扭轉(zhuǎn)壞死睪丸復(fù)位組（Necrotic testis detorsion group，NTD）：左側(cè)睪丸逆時(shí)針扭轉(zhuǎn)720°固定4h后復(fù)位睪丸；扭轉(zhuǎn)壞死睪丸切除組（Necrotic testis orchiectomy group，

4、NTO）：左側(cè)睪丸逆時(shí)針扭轉(zhuǎn)720°固定4h后切除睪丸。術(shù)后繼續(xù)飼養(yǎng)6周至性成熟期，采用快速脫頸椎法處死SD大鼠，切取對(duì)側(cè)睪丸石蠟包埋做光鏡下組織形態(tài)學(xué)觀察，以及免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)睪丸精原干細(xì)胞因子受體（Stem cell factor receptor, c-kit）及磷酯酰肌醇-3-激酶（Phosphoinositide3-kinase, PI3K）的表達(dá)。同時(shí)抽取心臟血液離心后取血清，ELISA法檢測(cè)血清性激素水平（卵泡刺激素

5、FSH、黃體生成素LH及睪酮T）。
　　(2)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel進(jìn)行整理，數(shù)據(jù)分析采用SPSS18.0完成。計(jì)量資料用X±S形式表示，各組間指標(biāo)差異的比較采用單因素分析進(jìn)行，若差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，則采用LSD法進(jìn)一步作兩兩比較。以P<0.05為差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　(1)組織形態(tài)學(xué)改變：CG組健側(cè)睪丸曲細(xì)精管內(nèi)生精上皮完好，無(wú)脫落，各級(jí)生精細(xì)胞均排列有序，無(wú)生精小管萎縮；NNTD組和 NNT

6、O組：健側(cè)睪丸均未出現(xiàn)明顯形態(tài)學(xué)改變；SNTD組和SNT O組：輕微的形態(tài)學(xué)改變，主要表現(xiàn)為生精上皮細(xì)胞層數(shù)減少，少量生殖細(xì)胞脫落于管腔中；NT D組和NT O組：前者睪丸生精上皮細(xì)胞層數(shù)減少明顯，部分生殖細(xì)胞脫落于管腔中，生殖細(xì)胞排列紊亂，可見生精小管萎縮，后者未出現(xiàn)明顯的形態(tài)學(xué)改變。
　　(2)睪丸組織中生精細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞的c-kit、PI3K的IOD值結(jié)果：NNTD組和NNTO組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）； S

7、NTD組和 SNTO組比較，差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；但 NTD組和 NTO組比較，NTD組中c-kit、PI3K的IOD值均明顯低于NTO（P＜0.05）。與假手術(shù)對(duì)照組比較，NNTD組、NNTO組及NTO組中c-kit、PI3K的IOD值均無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；與假手術(shù)對(duì)照組比較，SNTD組、SNTO組以及NTD組中c-kit、PI3K的IOD值均顯著降低（P<0.05）。
　　(3)血清性激素水平（卵泡

8、刺激素FSH、黃體生成素LH及睪酮 T）：FSH、LH在各組中升高，T水平降低，但各性激素水平（FSH、LH、T）在 NNTD組與 NNTO組間比較、以及SNTD組與SNTO組間比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；性激素水平（LH、FSH、T）在NTD組與NTO組間比較，NTD組的LH、FSH顯著升高， T明顯降低（P<0.05）。CG組各性激素水平（FSH、LH、T）分別與NNTD組、NNTO組以及 NTO組間比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)