尿毒癥毒素對腸上皮細(xì)胞屏障的損害作用及機(jī)制研究.pdf

1、＼＼惻必荊＼Y3391512中圖分類號：R69；R57；R37西南巨斜大粵SOUTHWESTMEDICALUNIVERSITY碩士學(xué)位論文——————————————————————————————————————————一尿毒癥毒素對腸上皮細(xì)胞屏障的損害作用及機(jī)制研究二。一八年五月西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文尿毒癥毒素對腸上皮細(xì)胞屏障的損害作用及機(jī)制研究摘要第一部分：尿毒癥血清對腸上皮細(xì)胞屏障結(jié)構(gòu)及功能的影響目的：觀察尿毒癥患者血清對腸上

2、皮細(xì)胞屏障結(jié)構(gòu)及功能的影響，為探究尿毒癥環(huán)境直接導(dǎo)致腸道功能障礙提供理論基礎(chǔ)及思路。方法：分別收集尿毒癥患者及健康志愿者空腹血，檢測肌酐、尿素、尿酸等重要生化指標(biāo)；以Caco2細(xì)胞為研究對象，用CCK8檢測10％、20％、30％、40％健康血清及尿毒癥血清在24、48、72h的時(shí)間梯度下對細(xì)胞增殖活性影響，篩選出最佳血清濃度及最適作用時(shí)間。將Caco一2細(xì)胞按空白對照組、健康組、尿毒癥組分組培養(yǎng)，以免疫熒光法檢測緊密連接蛋白ZO一1、O

3、ccludin、Claudin一1分布及形態(tài)變化，以免疫印跡法檢測上述蛋白的表達(dá)水平；建立Caco2細(xì)胞單層模型，通過光學(xué)顯微鏡觀察形態(tài)、堿性磷酸酶試劑盒檢測堿性磷酸酶活性、熒光素鈉檢測通透性以驗(yàn)證單層模型是否建立成功；將Caco一2細(xì)胞單層模型分為空白對照組、健康組、尿毒癥組分組培養(yǎng)，采用熒光素鈉透過實(shí)驗(yàn)檢測各組模型的屏障功能。結(jié)果：(1)與健康自愿者相比較，尿毒癥患者血清肌酐、尿素、尿酸明顯升高(尸O01)。(2)相較同濃度血清的健