甘藍(lán)型油菜隱性細(xì)胞核雄性不育上位抑制基因(esp)的分子標(biāo)記開(kāi)發(fā)與評(píng)價(jià).pdf

1、隱性細(xì)胞核雄性不育具有不育性穩(wěn)定徹底、恢復(fù)源廣和不存在胞質(zhì)負(fù)效應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),成為油菜雜種優(yōu)勢(shì)利用的一條重要途徑。目前,國(guó)內(nèi)外利用的油菜隱性核不育系主要有雙基因隱性核不育和隱性上位互作核不育兩種系統(tǒng),其中后者是利用最為成功的一種。9012AB屬于隱性上位互作細(xì)胞核雄性不育系統(tǒng),其育性受2對(duì)隱性重疊不育基因(ms3ms3ms4ms4)和1對(duì)隱性上位抑制基因(espesp)互作控制,即兩對(duì)隱性不育基因純合時(shí)表現(xiàn)雄性不育,但任何一個(gè)不育基因?yàn)轱@性或

2、上位抑制基因隱性純合時(shí)育性恢復(fù)。根據(jù)這種遺傳模式,隱性上位互作核不育系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)”三系化”繁殖與制種,即通過(guò)“臨保系”獲得100％不育群體,避免雜交種生產(chǎn)過(guò)程中拔去母本行50％可育株的麻煩。然而,由于育性受3對(duì)基因控制并且基因之間存在互作,依靠傳統(tǒng)的雜交、測(cè)交方式及其后代表型鑒定方法,選出性狀優(yōu)良的不育系和臨保系將是一項(xiàng)繁瑣低效的工作。開(kāi)發(fā)出與不育基因(ms3和ms4)和上位抑制基因(esp)連鎖的分子標(biāo)記,然后進(jìn)行分子標(biāo)記輔助選擇(M

3、arker Assisted Slection,MAS)將大大提高育種效率。本研究以甘藍(lán)型油菜隱性上位互作核不育系9012AB及其臨保系T45為基本材料,構(gòu)建了一個(gè)類似F2的分離群體,并開(kāi)發(fā)與esp基因緊密連鎖的分子標(biāo)記。同時(shí),對(duì)22種基因型未知的不同油菜材料進(jìn)行了遺傳分析和Esp/esp位點(diǎn)的基因型預(yù)測(cè)。在此基礎(chǔ)上,為了判斷標(biāo)記的有效性和適用性,我們使用32份不同來(lái)源的材料,對(duì)本研究中開(kāi)發(fā)出的分子標(biāo)記和實(shí)驗(yàn)室后期開(kāi)發(fā)出的43個(gè)與Esp

4、/esp位點(diǎn)連鎖的標(biāo)記進(jìn)行評(píng)價(jià),旨在為分子標(biāo)記輔助育種提供參考。取得的主要結(jié)果如下:
　　 1.采用AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)與BSA(Bulked SegregationAnalysis)結(jié)合的方法,篩選了1024對(duì)引物組合,獲得5個(gè)與esp緊密連鎖的AFLP標(biāo)記(L1,L2,L3,L4,L5)。所有的標(biāo)記都位于Esp/esp位點(diǎn)的一側(cè),其中L1,L3,L4,L5與

5、esp基因的遺傳距離均為0.8cM,L2與esp基因的遺傳距離為2.9 cM。
　　 2.與esp距離最近的4個(gè)AFLP標(biāo)記之中的一個(gè)標(biāo)記L1被成功地轉(zhuǎn)化成SCAR標(biāo)記SCL1,分析含有130個(gè)單株的大群體后,其與esp的遺傳距離為0.8 cM。
　　 3.對(duì)22種基因型未知的不同油菜材料進(jìn)行遺傳分析,最后推測(cè)出17種材料Esp/esp位點(diǎn)的基因型,只有一個(gè)材料的基因型為EspEsp,其余材料均為espesp。