核黃素對(duì)脂質(zhì)代謝的影響及作用機(jī)制的初步探討.pdf

1、目的：本研究旨在通過(guò)調(diào)查了解天津市靜海縣368名40~60歲居民的血脂、血脂異常率和血清核黃素水平的現(xiàn)狀，并分析血脂異常人群和血脂正常人群血清核黃素水平的差異；同時(shí)通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，初步探討核黃素對(duì)脂質(zhì)代謝的影響作用及調(diào)節(jié)機(jī)制，為核黃素膳食干預(yù)高血脂血癥人群提供理論依據(jù)。
　　方法：(一）人群調(diào)查：采用多階段整群隨機(jī)抽樣方法，于2012年選取天津市靜?？h6個(gè)村民委員會(huì)，在每個(gè)村民委員會(huì)中抽取75戶家庭中40~60歲的村民，共368名作

2、為研究對(duì)象（剔除不符合標(biāo)準(zhǔn)的戶數(shù)）。開展問(wèn)卷調(diào)查、血液采集，采集的血清應(yīng)用高效液相色譜儀和全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清核黃素和血脂水平；結(jié)合調(diào)查內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，采用單因素方差分析和兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析。（二）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：參照方法[1]建立高脂血癥大鼠模型，將造模成功的大鼠分為5組，即：空白對(duì)照組（Control）、模型對(duì)照組（HF）、核黃素低劑量組（HF+LR）、核黃素中劑量組（HF+MR）、核黃素高劑量組（HF+HR），每組10只，共計(jì)50

3、只。核黃素干預(yù)組按照相應(yīng)劑量（HF+LR組：0.667mg/kg， HF+MR組：3.385mg/kg，HF+HR組：6.670mg/kg）干預(yù)60天，空白對(duì)照組和模型對(duì)照組給予生理鹽水，分別在第0天、第20天、第40天、第60天眼內(nèi)眥靜脈叢采血（不禁食）取血，全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平，計(jì)算AI、API和TC/HDL-C值，每周稱量

4、體重。實(shí)驗(yàn)第61天（禁食）眼內(nèi)眥靜脈叢采血分離血清，ELISA法檢測(cè)血清載脂蛋白A1（ApoA1）、載脂蛋白B（ApoB）和卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶（LCAT）的水平，全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）水平；取部分肝組織參考文獻(xiàn)[2]制作10％肝勻漿，檢測(cè)肝勻漿中TC、TG和3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMGR)的水平，用 HE染色和油紅 O染色制作肝組織病理切片，光鏡下觀察肝組織病理

5、學(xué)形態(tài)。應(yīng)用Real-timePCR和Western blot法檢測(cè)肝臟DGAT2、LXRα、PPARγ、SREBP-1的mRNA表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：（一）人群調(diào)查：天津市靜?？h368名40~60歲人群，該人群血脂異常率、男性和女性血脂異常率分別為28.53%（105/368），31.55%（53/168），26.00%（52/200）；該人群、男性和女性的血清核黃素水平分別為（6.69±0.37）ug/mL、（6

6、.36±0.53）ug/mL、（6.97±0.51）ug/mL；血脂異常人群血清核黃素水平顯著低于血脂正常人群[(5.67±0.57) ug/mLvs.(7.10±0.45) ug/mL，P＜0.05]。
　?。ǘ﹦?dòng)物實(shí)驗(yàn)：1.干預(yù)第40、60天時(shí)，0.667mg/kg核黃素劑量組血清TC、LDL-C的水平均低于模型對(duì)照組（P＜0.05）。核黃素干預(yù)第60天，核黃素干預(yù)組AI、AIP、TC/HDL-C值均低于模型對(duì)照組，僅0.6

7、67mg/kg核黃素劑量組AI值、TC/HDL-C值與模型對(duì)照組間差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。核黃素干預(yù)第61天，0.667mg/kg和3.385mg/kg核黃素劑量組血清 ApoB的水平和ApoB/ApoA-1比值明顯低于模型對(duì)照組（P＜0.05）；0.667mg/kg和3.385mg/kg核黃素劑量組肝臟 TG水平較模型對(duì)照組降低（P＜0.05），0.667mg/kg黃素素劑量組肝臟TC水平較模型對(duì)照組降低（P＜0.05）。

8、
　　2.核黃素干預(yù)第61天，核黃素干預(yù)組血清AST、LCAT的水平較模型對(duì)照組間差異未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；0.667mg/kg核黃素劑量組血清ALT、HMGR的水平較模型對(duì)照組低，且差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3.通過(guò)HE和油紅O染色肝臟組織切片，鏡下觀察肝組織切片發(fā)現(xiàn)高脂血癥大鼠各組肝組織均有不同程度損傷和脂肪沉積，但是核黃素干預(yù)組的肝臟損傷程度和脂肪沉積的量較模型對(duì)照組低。
　　4. Re

9、al-time PCR檢測(cè)結(jié)果顯示：0.667mg/kg和3.385mg/kg核黃素劑量組肝臟DGAT2、SREBP-1的mRNA表達(dá)水平較模型對(duì)照組降低（P＜0.05）；Western blot結(jié)果表明0.667mg/kg和3.385mg/kg核黃素劑量組肝臟SREBP-1蛋白表達(dá)水平較模型對(duì)照組降低（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.天津市靜?？h368名40~60歲人群，血脂異常率偏高為28.53%（105/368）

10、，以高TG血癥以主；血脂異常人群血清核黃素水平顯著低于血脂正常人群。
　　2.核黃素可有效降低高脂血癥大鼠血清TC、LDL-C、ApoB的水平、肝臟TC、TG的水平和肝臟細(xì)胞內(nèi)脂肪沉積，說(shuō)明核黃素具有影響脂質(zhì)的作用；核黃素還可以降低AI值和TC/HDL-C的比值。
　　3.觀察不同濃度核黃素對(duì)高脂血癥大鼠脂質(zhì)代謝酶LCAT、HMGR，脂質(zhì)代謝相關(guān)因子DGAT2、LXRα、PPARγ、SREBP-1mRNA表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水