探討糖尿病大鼠椎間盤(pán)中TGF-β和IGF-1的含量變化及其對(duì)糖尿病大鼠椎間盤(pán)的作用意義.pdf

1、目的：
　　測(cè)定鏈脲佐菌素處理后造成糖尿病狀態(tài)的大鼠和正常大鼠椎間盤(pán)組織中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGF-β）和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（IGF-1）在三個(gè)不同時(shí)期的含量變化，并探討含量之間差異的意義。
　　方法：
　　13月齡成熟雄性SD大鼠30只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組以及對(duì)照組，每組SD大鼠各15只，實(shí)驗(yàn)組SD大鼠采用腹腔單次注射鏈脲佐菌素溶液(strep-tozotoein，STZ)，通過(guò)鏈脲佐菌素對(duì)胰腺胰島β-細(xì)胞的制毒作用，致

2、使胰島素生成障礙，從而造成糖尿病狀態(tài)，建立糖尿病大鼠模型，對(duì)照組SD大鼠不做特殊處理，僅給予腹腔單次注射檸檬酸鹽緩沖液。
　　2分別在第2、4、6周時(shí)，從實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各取5只大鼠，用1％戊巴比妥鈉進(jìn)行腹腔注射處死大鼠后，取其各組SD大鼠新鮮腰椎間盤(pán)組織，用4%多聚甲醛進(jìn)行固定，梯度乙醇脫水，包埋成石蠟組織塊。分別行蘇木素-伊紅(HE)染色法，二甲苯透明后，中性樹(shù)脂封片顯微鏡下觀察兩組大鼠椎間盤(pán)組織病理變化情況。免疫組化法，脫蠟加

3、入一抗二抗后，辣根酶標(biāo)記，DAB顯色顯微鏡下觀察兩組大鼠椎間盤(pán)組織中TGF-β和IGF-1的含量。選取其中最有意義的，陽(yáng)性表達(dá)最強(qiáng)的5個(gè)視野進(jìn)行計(jì)算，以細(xì)胞質(zhì)著色和陽(yáng)性細(xì)胞率為判斷標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計(jì)兩組大鼠椎間盤(pán)中TGF-β和IGF-1的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1經(jīng)鏈脲佐菌素注射液處理后的糖尿病組模型大鼠，血糖濃度明顯升高，與正常組對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。糖尿病組血糖濃度分別在第2、4、6周時(shí)相對(duì)于正常組，差異有

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2在3個(gè)不同時(shí)期，實(shí)驗(yàn)組大鼠的椎間盤(pán)均出現(xiàn)不同程度的退行性改變，HE染色顯示可見(jiàn)脊索細(xì)胞減少，增生出較多膠原纖維，終板呈不同程度的鈣化，出現(xiàn)類軟骨細(xì)胞，纖維環(huán)呈蜿蜒狀排列，髓核基質(zhì)排列紊亂、減少，呈不同程度的皺縮，髓核及纖維環(huán)向外膨出；部分髓核細(xì)胞排列成簇，這是椎間盤(pán)退變的標(biāo)志。而對(duì)照組正常大鼠，椎間盤(pán)結(jié)構(gòu)正常，終板由一層透明軟骨組成，纖維環(huán)具有規(guī)則的層狀結(jié)構(gòu)，膠原束排列整齊平行，以成纖維細(xì)胞為主

5、，髓核與纖維環(huán)分界清楚，其中成條索狀分布的脊索細(xì)胞較為豐富，基質(zhì)中細(xì)胞充實(shí)。
　　3免疫組化法測(cè)定，對(duì)照組大鼠中TGF-β染色陽(yáng)性率在3個(gè)不同時(shí)期無(wú)差異（P=0.368），對(duì)照組大鼠中IGF-1染色陽(yáng)性率在3個(gè)不同時(shí)期無(wú)差異（P=0.368）；實(shí)驗(yàn)組大鼠中TGF-β的陽(yáng)性染色率在3個(gè)不同時(shí)期無(wú)差異（P=0.311），實(shí)驗(yàn)組大鼠中IGF-1的陽(yáng)性染色率在3個(gè)不同時(shí)期無(wú)差異（P=0.727）。實(shí)驗(yàn)組大鼠椎間盤(pán)組織中TGF-β的含量在3

6、個(gè)不同時(shí)期均明顯低于對(duì)照組(P<0．05)。實(shí)驗(yàn)組大鼠椎間盤(pán)組織中IGF-1的含量在3個(gè)不同時(shí)期均明顯低于對(duì)照組(P<0．05)。
　　結(jié)論：
　　本研究結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組中STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠椎間盤(pán)中TGF-β和IGF-1含量較對(duì)照組正常大鼠明顯減少，在椎間盤(pán)HE染色中可以觀察到,實(shí)驗(yàn)組糖尿病大鼠椎間盤(pán)的形態(tài)發(fā)生了退變性改變，這種TGF-β和IGF-1含量的降低，引起了椎間盤(pán)內(nèi)基質(zhì)的降解，抑制軟骨基質(zhì)的合成，使其未分化間充質(zhì)