Angiopoietin-1對高糖培養(yǎng)內(nèi)皮細胞連接相關(guān)蛋白的影響.pdf

1、目的:觀察高糖培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞連接相關(guān)蛋白(occludin、VE-cadherin和connexin40)的表達變化,探討Ang-1對高糖環(huán)境下這些內(nèi)皮細胞連接相關(guān)蛋白的影響。
　　 方法:將體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞隨機分為正常組(5.5mmol/L葡萄糖),甘露醇組(5.5mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇),高糖組(30mmol/L葡萄糖),Ang-1干預組(30mmol/L葡萄糖+0.25mg/LAng

2、-1),用相應的培養(yǎng)基培養(yǎng)24h、48h后收集細胞,分別用實時定量聚合酶鏈反應(Real-TimePCR)檢測各組臍靜脈內(nèi)皮細胞occludin、VE-cadherin和connexin40mRNA的表達,免疫熒光、免疫組化方法檢測各組臍靜脈內(nèi)皮細胞occludin、VE-cadherin和connexin40蛋白的表達。
　　 結(jié)果:(1)正常組和甘露醇組細胞均有occludin、VE-cadherin和connexin40m

3、RNA的表達,但兩組間無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05);高糖組細胞occludin、VE-cadherin和connexin40mRNA的表達均較正常組下調(diào)(P＜0.01),并呈時間依賴性(24hvs48h,P＜0.05);Ang-1干預組細胞occludin、VE-cadherin和connexin40mRNA的表達雖低于正常組(P＜0.05),卻較高糖組表達上調(diào)(P＜0.05),(2)免疫熒光和組化顯示occludin、VE-cad

4、herin和connexin40主要表達于胞膜和胞漿,正常組和甘露醇組細胞均有表達,但兩組間無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05);高糖組細胞occludin、VE-cadherin和connexin40蛋白表達均較正常組下調(diào)(P＜0.01),并呈時間依賴性(24hvs48h,P＜0.05);Ang-1干預組細胞occludin、VE-cadherin和connexin40蛋白表達雖低于正常組(P＜0.05),卻較高糖組表達上調(diào)(P＜0.05