大鼠彌漫性軸索損傷中炎癥因子的表達及檢測.pdf

1、目的:檢測大鼠彌漫性軸索損傷后炎癥因子TNF-α、IL-1和IL-2在軸索損傷位點的表達和聚集及其與β淀粉樣前體蛋白(β-amyloid precursor protein,β-APP)聚集的相關(guān)性。
　　 方法:30只雄性SD大鼠被隨機分成對照組(n=5)和實驗組(n=25)兩組.實驗組大鼠采用Marmarou方法制作大鼠DAI模型,對照組大鼠只進行假手術(shù)操作.分別于傷后3h、6h、12h、24h和48h處死5只實驗組大鼠,制

2、備腦組織切片,經(jīng)HE染色和Bielschowsky染色對新皮層、海馬、胼胝體的軸索損傷進行形態(tài)學觀察,應(yīng)用免疫組織化學法染色檢測各時間點大鼠腦新皮層、海馬、胼胝體β-APP和TNFα、IL-1、IL-2的表達.對照組大鼠腦組織處理過程與實驗組相同。
　　 結(jié)果:大鼠傷后3h即可出現(xiàn)軸索排列紊亂,神經(jīng)元變性損傷,傷后12h-24h,可見軸索回縮球形成,傷后48h可見多處軸索斷裂和散在分布的軸索回縮球;與對照組相比,傷后3h～48h

3、,大鼠新皮層、海馬及胼胝體區(qū)域β-APP的整體光密度值在傷后3h即有顯著增加,并在傷后48h內(nèi)持續(xù)升高;在新皮層、海馬及胼胝體區(qū)域TNFα和IL-1的表達類似,其平均光密度值在傷后3h即有顯著性增加,并于傷后6～12h達到高峰,之后開始逐漸下降,但在傷后48h時其在新皮層、海馬和胼胝體內(nèi)的平均光密度值仍顯著高于對照組。在上述區(qū)域內(nèi),IL-2的平均光密度值在傷后3h時有顯著性升高,但在6～24h內(nèi)逐漸下降,傷后48h又有顯著升高。傷后β-

4、APP的整體光密度值與TNFα和IL-1的平均光密度值均有顯著相關(guān)性。而IL-2的平均光密度值與β-APP的整體光密度值卻無顯著的相關(guān)性。
　　 結(jié)論:大鼠DAI后伴隨著軸索損傷的進展,β-APP的聚集在48h內(nèi)逐漸加重。大鼠DAI后腦內(nèi)TNFα和IL-1的表達類似,早期快速增加,6-12h達到高峰,后逐漸開始下降。TNFα和IL-1的表達與β-APP的聚集具有一定的相關(guān)性,可能參與到DAI后的繼發(fā)性腦損傷。DAI后早期IL-2